定殖烟草根结线虫卵和雌虫机会真菌的多样性

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1、万方数据Diversityofopportunisticfungicolonizingeggsandfemalesofroot—knotne．matodesontobaccoThesissubmittedtoeslsSUQngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyLinSen(DepartmentofPlantpathology)Supervisor：WuXiaQingdao，ChinaJune，2013万方数据学位论文独创性声明本人声明所呈

2、交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，·除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。如不实，本人负全部责任。学位论文作者签名：签字日期佃B年厂月阳Et学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(

3、保密的学位论文在解密后适用本授权书)研究生签名：导师签名：私麓．硪复时间：矽侈年办Ⅻ时间：砂倍年多1加日万方数据青岛农业大学硕士学位论文摘要烟草根结线虫病害是我国烟草主要病害之一，机会真菌对根结线虫的生物防治具有巨大潜力。本研究于2010．2012年针对来源于中国7个省份的157份烟草根结线虫样本，分别分离烟草根结线虫游离卵、卵块和雌虫上定殖的机会真茵。应用rDNA．ITS片段测序结果结合茵株的形态学观察和培养性状鉴定定殖游离卵、卵块和雌虫上的真菌。根据分离到菌株的培养性状、形态学和rDNA—ITS序列分析，对定殖于南方根结线虫或北方根结线虫的9839个游离卵、408个

4、卵块和284个雌虫的真茵菌株，明确鉴定出9属13个种，即淡紫紫孢茵、长梗木霉、紫变青霉，尖镰刀茵、芬芳镰刀菌、茄镰刀茵、交链格孢、交枝项孢、细小枝顶孢、虫草棒束孢、渐狭蜡蚧茵、瓜曲霉和黑曲霉。其中定殖根结线虫新记录种5个，即长梗木霉、芬芳镰刀茵、渐狭蜡蚧茵、虫草棒束孢和交枝顶孢。根结线虫的寄生真菌以卵寄生真菌为主，分离到11个种，分离频率高达62．62％。淡紫紫孢茵Purpureocilliumlilacinum(原名：淡紫拟青霉)为优势种，分布广泛，在云南、安徽、湖北、贵州和山东省均被分离到。该菌在南方根结线虫和北方根结线虫的游离卵、卵块和雌虫平均分离率分别为0．49

5、％、24．00％和16．90％，说明其地理和生态适应性广泛。雌虫上的定殖真茵多样性指数最高。从地区上来看，发病较轻的地区，山东、湖北的烟草根结线虫定殖真菌的多样性指数最高，广西发病较重，多样性指数最低。交枝顶孢能够寄生南方根结线虫生活史中的卵、2龄幼虫和雌虫，同时对卵块内卵孵化具有明显的抑制作用。该菌茵丝在卵表面形成侵染钉，卵壳皱缩凹陷，卵胚胎发育停止和内容物凝集，卵内长满茵丝，有时可见到茵丝上形成瓶粳细胞和分生孢子。第6d卵和2龄幼虫的寄生率分别为82．11％和73．97％。分离自贵州的尖孢镰刀茵GUlFl，山东蒙任的尖孢镰刀菌MREMli安徽的茄镰刀菌ANEM3，湖

6、北的尖孢镰刀茵HUEM2，云南鲁甸的芬芳镰刀菌YLEM6、尖孢镰刀茵YLEM3均能寄生南方根结线虫卵。寄生率分别为55．5％、64．1％、72．5％、70．8％、60．9％、61．7％。渐狭蜡蚧茵、长梗木霉、虫草棒束孢以及交支项孢均能够产生几丁质降解酶系。最大酶活高峰分别为16．48}Jxnol·h-1．ml～，24；89“rnol·h-1．ml～，22．22IJaaol·h-10ml～，18．499mol·h-1．rnl～。用活性电泳测定他们的几丁质酶分子量，交枝顶孢有4条几丁质酶活性蛋白谱带，分子量分别为98．0kDa,82．9kDa,70．2kDa,35．9kDa

7、。长梗木霉有5条几丁质酶活性蛋白谱带，分子量分别为153．4kDa,112．8kDa,100．9kDa,50．2kDa,33．9kDa。交枝顶孢几丁质粗酶液处理南方根结线虫卵，第7d卵的孵化抑制率为80．17％。关键词：烟草；机会真菌；根结线虫；寄生；几丁质酶活性万方数据青岛农业大学硕士学位论文AbstractTobaccoroot—knotnematodeisoneofthemostseriousdiseasesontobaccoinchina．Suppressionofplantparasiticnematodeswithnemato