药学毕业论文--悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

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1、悦肝胶囊对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用作者:蔡英兰，金政，朴丽花，李相伍,金美善□□【关键词】悦肝胶囊；〃肝损伤；〃大鼠；〃肝细胞□□摘要：目的探讨悦肝胶囊对四氯化碳（CCI4）损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用。方法以CCI4诱导大鼠肝细胞损伤模型,观察悦肝胶囊对肝细胞的琥珀酸脱氢酶（SDH酸性磷酸酶（ACPase葡萄糖・6-磷酸酶（G6Pase）活性和糖原含量以及肝细胞形态结构的L-L-J影响。结果悦肝胶囊能显著提高SDH、G6Pase活性及糖原含量，抑制ACPase活性，并可显著改善

2、受损肝细胞的形态结构变化。结论悦肝胶囊对CCI4损伤原代培养大鼠肝细胞具有保护作用。□□关键词：悦肝胶囊；肝损伤；大鼠；肝细胞□□ProtectiveEffectsofYueganCapsuleonCCI4inducedInjuryofPrimaryCulturedRatHepatocytes□□Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofYueganCapsuleonCCI4intoxicatedprimaryculturedrathepatocytes.Me

3、thodsHepatocytesinjurymodelswereinducedbyCCI4inratsinvitro,andtreatedwithYuegancapsule.StructureofrathepatocytesandeffectofSDH、ACPase、G6Paseactivetiesandamountofhepaticglycogenwereobserved・ResultsTheYueganCapsuleincreasedtheactivityofSDH,G6Paseandtheamou

4、ntofhepaticglycogen,andrestraintheactivityofACPase,andcouldimprovethechangesofrathepatocytesstructure.ConclusionYuegancapsulehasprotectiveeffectsonCCI4inducedinjuryofprimaryculturedrathepatocytes・□□Keywords:YueganCapsules;Liverfailure;Rats;Hepatocytes□□悦

5、肝胶囊主要由葛根、丹参、西洋参、麦冬等中药组成，是吉林省延边中医院肝病科以〃活血化瘀、通络养肝〃为基本治则而研制的复方中药制剂，具有利胆退黄及保肝解毒作用［1,21原代培养肝细胞已用于多方面的硏究,其灵敏度高、参差性小、再现性好。本L-L-J实验以CCI4诱导大鼠肝细胞损伤模型，观察悦肝胶囊对CCI4损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用,并进一步探讨了其机理。□1材料□1.1动物Wistar系大鼠（乳鼠）由延边大学医学部资产与实验管理办公室实验动物科提供。□□1.2药品与试剂悦肝胶囊：延边大学医学部药学院天

6、然药物教研室分离、提冃根30g,丹参30g,麦冬20g,西洋参20g加蒸f留水煮1h后过滤，滤出液备用，把原药再煮沸1h后过滤，混合2次滤液浓缩成100ml）;CCI4:北京化学试剂厂产品；东宝肝泰片：中国通化东宝药业股份有限公司产品；新生小牛血清:杭州四季青生物工程公司产品；RPMI1640培养基：GIBCO公司产品；胰蛋白酶：DIFCO公司产品；胶原酶：SIGMA化学公司产品。□1.3仪器SC35型倒置显微镜：日本OLYMPUS产品;VANOX型万能显微镜:日本OLYMPUS产品；S3500N型扫描

7、电镜：日本HITACHI公司产品；TD2000型图像分析仪:北京天地百年科技有限责任公司产品。□2方法2.1原代单层乳鼠肝细胞培养方法采用姜玉顺等［3健立的方法培养至3~4d后用于实验。□2.2CCI4诱发培养肝细胞损伤病理模型的制备用RPMI1640培养液配成3,5,7mol/L浓度经筛选,选用5mol/L浓度为本实验可逆性肝细胞损伤模型。□□23分组培养大鼠肝细胞3-4dz取生长良好的培养瓶40瓶分为4组。正常对照组每隔3天更换培养基模型对照组加入5mol/LCCI4;药物对照组加入5mol/LCC

8、I4+0.24mg/L东宝肝泰;实验组加入5mol/LCCI4+1.5mg/L悦肝胶囊。作用24h后，模型1=1对照组换接种培养基；药物对照组换加有0.24mg/L东宝肝泰的培养基；实验组换加有1.5mg/L悦肝胶囊的培养基继续培养。□2.4细胞化学观察取生长盖玻片，显示SDH、ACPase、G6Pase和糖原。SDH显示采用亚铁氧化甲法；ACPase显示采用Gomori法；G6Pase显示采用Wachstein法；糖原显示采用PAS反应。