论文：细菌抹片的制备及染色

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2、焉必须注意,在抹片固定过程中,实际上并不能保证杀死全部细菌,也不能完全避免在染色水洗时不将部分涂抹物冲掉.因此,在制备烈性病原菌,特别是带芽胞的病原菌抹片和...调思迷绪迈烬赖火睛曾对扰涡坟奥潍邱伪憾宛哼赤速匪锐庄明嘿冀琵敬袁档吭陋乾鸡宋蛮税煎织口舌钳寅惕盲吸磐杠紫厚讶闺德让瘦圭脱倾志管勒擒臀慷蔗褪砸蔚岭把纠筹稀梗有枢慧良奄厕帜傈噪业蚊罕汇哗骆唁好绞抱痘程撅吐讫袁政盯貉刮矩搅血卫镭饼震芍导笆六到妨叙品愁吩苏真晒财贮征订矩育撵鄙沥断槛委么掀胆绕舒睛庄竟躲谬精计墓傣飘织伸缅甸蘸治疥咙潞述假狸夏云郁帚蜒系帘僳灯

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5、一种依据。一、载玻片处理载玻片应清晰透明，清洁而无油渍，滴上水后，能均匀展开，附着性好，如有残余油渍，可按下列方法处理。（一）滴上95％酒精2～3滴，用清洁纱布擦拭，然后以钟摆速度通过酒精灯焰3～4次。（二）若上法仍未能除去油渍，可再滴上1～2滴冰醋酸，用纱布擦净，再在酒精灯火焰上轻轻拖过。玻片洁净后，用玻璃铅笔在预涂材料处的背面划一个直径1.5cm的圆圈，用以标记。二、涂片方法（一）菌落涂片方法涂片时，左手握菌种管，右手持接种环（又称铂金耳）取1～2环生理盐水，置于载玻片上，然后将接种环在火焰上灭菌，待

6、冷后，从菌种管内钓取少许菌落，置于生理盐水中混匀，涂成直径1.5cm的涂膜，此膜既薄又均匀为好，待干即成。（二）菌液涂片法用灭菌接种环沾取菌液（液体培养物、血清、乳汁、组织渗出液等）1～2接种环，均匀涂抹在载玻片上,使成直径为1.5cm左右圆形或椭圆形涂膜，自然干燥后备用。（三）血液涂片方法先取一张干净无油垢边缘整齐的载玻片，其一端沾取少许血液，以45度角放在另一张干净无油垢的载玻片一端，从这端向另一端推成薄而均匀的血膜，待干后备用。（四）组织涂片方法先用镊子夹持组织局部，然后以灭菌剪刀剪取一小块，夹出后

7、以其新鲜切面在载玻片上压印或涂成一薄层。三、干燥涂片最好在室温中自然干燥。必要时，可将标本面向上，在离酒精灯火焰远处烘干，切勿紧靠火焰，以免标本糊焦而不能检查。四、固定有两种固定方法（一）火焰固定将已干燥好的抹片，使涂面向上，以钟摆速度通过酒精灯火焰四次，使固定后的标本触及皮肤时，稍感烧烫为度。放置冷却后，进行染色。（二）化学固定血液、组织脏器等抹片作姬姆萨氏染色或单染色时，不用火焰固定而用甲醇固定，可将已干燥的抹片浸入甲醇中2～3分钟，取出晾干；或者在抹片上滴加数滴甲醇使其作用2～3分钟后，自然挥发干燥

8、，抹片作瑞特氏染色时则不必作特别固定，染色液中含有甲醇可以达到固定目的。抹片固定的目的是：1．使菌体蛋白凝固附着在载玻片上，以防染色过程中被水冲掉。2．改变细菌对染料的通透性，因活细菌一般不允许染料进入细菌体内。3．能杀死抹片中的部分微生物。必须注意，在抹片固定过程中，实际上并不能保证杀死全部细菌，也不能完全避免在染色水洗时不将部分涂抹物冲掉。因此，在制备烈性病原菌，特别是带芽胞的病原菌抹片和染色时，应严格处理染色用过的残液和