呼吸道感染患者外周血中肺炎嗜衣原体的检测与分析

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1、分类号密级UDC编号硕士学位论文呼吸道感染患者外周血中肺炎嗜衣原体的检测与分析研究生姓名：吴华指导教师姓名、职称：吴移谋教授学科、专业名称：病原生物学研究方向：病原微生物快速诊断与防治机制2013年4月南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人

2、完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名：导师签名：年月日年月目录主要英文缩略语索引…………………………………………………....2中文摘要………………………………………………………

3、………....3英文摘要………………………………………………………………....5论文正文………………………………………………………………....8前言……………………………………………………………………….8实验材料……………………………………………………………………...10实验方法……………………………………………………………………...12实验结果……………………………………………………………………...18讨论……………………………………………………………………...26结论………………………………………………

4、……………………...30参考文献………………………………………………………………..31综述…………………………………………………………………..35研究成果及发表文章………………………………………………..43致谢…………………………………………………………………..441主要缩略语英文索引缩略语全称中文名称AA/aaAminoacid氨基酸bpBasepair碱基对DNADeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸CpnChlamydophilapneumoniae肺炎嗜衣原体CtChlamydiatrac

5、homatis沙眼衣原体dNTPDeoxyndeosidetriphosphate脱氧三磷酸核苷酸RNARibonucleicacid核糖核酸EBEthidiumbromide溴化乙啶EDTAEthylenediamietetraaceticacid乙二胺四乙酸ELISAEnzymelinkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附试验RNaseRibonuclease核糖核酸酶KD/kDaKilodalton千道尔顿PBSPHosopHatebufferedsaline磷酸盐缓冲液PCRPolymerasec

6、hainreaction聚合酶链反应TBSTris-bufferedSalineTris缓冲盐溶液TBSTTween20/Tris-bufferedSaline吐温20/Tris缓冲盐溶液ODOpticaldensity光密度HRPHorseradishperoxidase辣根过氧化物酶rpmRevolutionsperminute每分钟转数LBLria-bertainmediumLB培养基MrMolecularweight分子量NCNitrocellulose硝酸纤维素膜COPDChronicabstractivepu

7、lmonarydisease慢性阻塞性肺疾病WBCWhitebloodcell白细胞RBCRedbloodcell红细胞2呼吸道感染患者外周血中肺炎嗜衣原体的检测与分析硕士研究生：吴华导师：吴移谋教授中文摘要目的：应用PCR法和ELISA法分别检测呼吸道感染患者PBMC和RBC中的CpnDNA及血清中Cpn-IgG，以了解本地区Cpn的感染率；并结合呼吸道感染患者病史及其他临床资料，分析在呼吸道疾病中Cpn感染的重要性，为监测该病原体的流行及进一步研究其预防措施提供一定的参考。方法：收集173名呼吸道感染患者和52名健康

8、体检者外周血标本，分离PBMC、血清和红细胞。用基因组DNA提取试剂盒提取纯化PBMC和RBC中的DNA，以该DNA为模板，用特异性引物体外PCR扩增Cpn16SrRNA和MOMP基因。扩增产物按照标准方法在1.5%琼脂糖凝胶中电泳鉴定，并对产物DNA进行测序，并与Genebank中登录的CpnAR-39序列进行BL