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1、中图分类号：R722.6硕士学位论文DRP1和OPA1在高体积氧诱导早产大鼠肺损伤的作用院（系）、所临床医学院研究生姓名余莉学科、专业儿科学(新生儿专业)导师姓名董文斌教授二Ο一三年四月1本研究基金来源：四川省教育厅科研项目基金（编号：08ZA150-033）四川省卫生厅科研基金(编号：90191)中华儿科杂志第二届双鹤珂立苏科研基金2目录1DRP1和OPA1在高体积氧诱导早产大鼠肺损伤的作用…11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言…………
2、…………………………………………………81.4材料与方法……………………………………………………101.5结果……………………………………………………………161.6讨论……………………………………………………………261.7结论……………………………………………………………351.8参考文献………………………………………………………361.9英汉缩略词对照表……………………………………………432致谢……………………………………………………………443线粒体融合分裂与疾病关系(综述)…………………………454攻读硕士学位期间发
3、表和撰写的论文………………………553DRP1和OPA1在高体积氧诱导早产大鼠肺损伤的作用摘要目的研究DRP1（dynaminrelatedprotein1）和OPA1（opticatrophy1)在高体积氧诱导早产大鼠肺损伤时细胞凋亡中的作用。方法1.以早产大鼠肺组织细胞为研究对象。随机将早产Wistar大鼠48只分为高氧组和对照组，高氧组吸入95%的氧（建立高氧肺损伤模型）,对照组吸入21%的氧的常压空气。相同常规喂养1d、3d、7d分批离断早产鼠颈放血处死后取肺组织做石蜡切片。2.检测指标：采用苏木精-伊红（hematei
4、neosinHE）染色在光镜下观察早产鼠肺组织的病理形态学变化；免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（streptavidin-peroxidaseSP）观察与线粒体形态变化相关的蛋白：动力相关蛋白(dynaminrelatedprotein1DRPl)和视神经萎缩症蛋白(opticatrophyOPAl)在各组早产大鼠肺组织的表达和分布及其比值变化；采用原位末端转移酶标记技术（terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabelingTUNEL）评价各组早
5、产大鼠肺组织细胞凋亡情况。3.统计学处理：应用SPSS16.0软件，所有数据以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两组比较进行配对t检验和采用LSD法检验（a=0.05），指标间的关系采用直线相关分析进行处理,P<0.05为差异有统计学意义。结果1.高氧组早产大鼠肺组织细胞可见典型的肺损伤病理形态学改变。在光镜下观察，对照组大鼠肺组织细胞紧密排列多角扁平状，呈鹅卵石样改变,透明度好，胞质中颗粒稀少。高氧组大鼠肺组织细胞数量随时1间（1d、3d、7d）较对照组显著减少，细胞形态改变不规则，肺泡结构破坏明显，透光度减弱，较多空泡
6、、脂肪小滴、颗粒聚集物出现在胞质中，细胞间隙变大，细胞碎片大量填充细胞间，间隔增粗肺泡腔变小。2.免疫组织化学法测定DRP1表达：高氧组与对照组相比，高氧组细胞胞质中DRPl表达显著升高，差异有统计学意义(p<0．05)。DRP1在高氧组平均光密度(Mean±SD)1d(1634.57±108.85),3d(8008.14±530.26),7d(13132.32±594.57);DRP1在对照组平均光密度值(Mean±SD)1d(789.86±58.95),3d(772.31±42.82),7d(770.39±67.8)。3.免
7、疫组织化学法测定OPAl表达：高氧组与对照组相比,高氧组细胞胞质中OPA1表达显著降低，差异有统计学意义(p<0.05)。OPA1在高氧组平均光密度值(Mean±SD)1d(3126.91±264.91),3d(1399.81±268.62),7d(579.76±99.20);OPA1在对照组平均光密度值(Mean±SD)1d(3935.42±263.99),3d(3764.15±281.53),7d(3907.80±231.34)。4.与对照组相比,高氧组DRP1/OPA1表达的比值呈时间依赖性增高，差异有统计学意义(p<0．
8、05):高氧组DRP1/OPA1的比值表达(Mean±SD)1d(0.52±0.01),3d(5.72±0.05),7d(22.68±0.07);对照组DRP1/OPA1的比值表达(Mean±SD)1d(0.200±0.01),3d(0.205±0.01),7d
