肺癌血浆中特异性mirna标志物的筛选及研究

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1、密级:学校代码:10075分类号：学号:20121254理学硕士学位论文肺癌血浆中特异性miRNA标志物的筛选及研究学位申请人：沈志高指导教师：钟理教授学位类别：理学硕士学科专业：细胞生物学授予单位：河北大学答辩日期：二○一五年六月ClassifiedIndex:Code:10075U.D.C:NO:20121254ADissertationfortheDegreeofM.ScienceScreeningandresearchofspecificmiRNAbiomarkersinplasmaoflungcancerCandidate：ZhigaoShenSupervisor：Prof.LiZh

2、ongAcademicDegreeAppliedfor：MasterofScienceSpecialty：CellBiologyUniversity：HebeiUniversityDateofOralExamination：June，2015摘要摘要背景：肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，全球每年新发病例约161万，致死率在各种癌症中居于首位。临床资料显示早期发现肺癌可以提高患者的5年生存率，因此实现癌症的早期诊断及有效治疗成为提高患者存活率的关键，其中高特异性及高灵敏度的肿瘤标志物在癌症诊治中发挥重要作用。miRNA是一类非编码的小分子RNA，广泛存在于生物体内，miRNA的生物功能是多种多样的，

3、它们广泛参与生物体的发育、增殖、分化、衰老、凋亡等众多生理病理过程。研究发现miRNA与肺癌的发生发展以及预后有很大的关联性。本文通过筛选血浆中特异表达的miRNA，冀望能找到特异表达的miRNA以及能作为肺癌早期诊断标志物的特异miRNA。方法：利用肺癌相关基因和文献报道寻找与肺癌相关的miRNA，选取50例肺癌患者为疾病组和50例健康人为对照组，以U6作为内参，经过提取血浆中的总RNA，合成miRNA对应的颈环逆转录引物，反转录为cDNA，使用荧光定量PCR仪进行荧光定量PCR，利用SPSS软件分析肺癌和对照组miRNA表达的差异，miRNA与是否吸烟的相关性，以及miRNA在肺癌诊断中的

4、价值。结果：通过提取血浆中的miRNA、经过逆转录、荧光定量PCR及统计学分析，确认了所选miRNA在肺癌组和对照组的差异表达，并且分析了吸烟与否和miRNA的相关性，最后研究了miRNA在肺癌诊断中的价值。结论：成功构建了一套从血浆中miRNA的提取到荧光定量PCR的体系。证实了miRNA在肺癌患者和健康人之间的miRNA表达有差异，探讨了吸烟与miRNA表达的关系，最后评价了miRNA在肺癌诊断中的价值，为进一步的临床试验提供了试验依据。关键词：肺癌miRNA差异表达荧光定量PCRⅠAbstractAbstractBackground:Lungcancerisoneofthemostcom

5、monmalignancy.Thenewcasesisabout1.61millioneachyearworldwide.Itsmortalityisthebiggestinvariouscancers.Clinicaldatashowthatearlydetectionoflungcancercanimprove5-yearsurvivalrate.Therefore,toachieveearlydiagnosisandeffectivetreatmentofcancerhasbecomethekeytoimprovingpatientsurvival.Includinghighspecif

6、icityandhighsensitivityoftumormarkersplayanimportantroleincancerdiagnosisandtreatment.miRNAareaclassofsmallnon-codingRNAmolecules,theyarewidelypresentinvivo.miRNAhavediversebiologicalfunction,Theyarewidelyinvolvedinmanyphysiologicalandpathologicalorganismsdevelopment,suchasproliferation,differentiat

7、ion,senescence,apoptosisandotherprocesses.StudyfoundthatthemiRNAhasgreatrelevancewiththeoccurrenceanddevelopmentoflungcanceranditsprognosis.Inthispaper,specificexpressionofmiRNAisscreenedinplasma,hopi