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1、万方数据·技术与方法·生物技术通报BIOTECHNOLOGYBULLETlN2010年第8期DNA测序技术的发展历史与最新进展解增言林俊华谭军舒坤贤(重庆邮电大学生物信息学院.重庆400065)摘要:DNA测序技术是现代分子生物学研究中最常用的技术。从1977年第一代测序技术的出现。经过30多年的发展,DNA测序技术取得重大进展,以高通量为特点的第二代测序技术逐步成熟并商业化,以单分子测序为特点的第三代测序技术也已经出现。介绍每一代测序技术的特点,并重点介绍了第二代测序技术及其应用。展望新的测序技术时于未来生物学研究及人们自身健康与人类疾病等方面研究的影响。关键词:第一代DNA测序技术
2、第二代DNA测序技术第三代DNA测序技术高通量单分子测序TheHistoryandAdvancesofDNASequencingTechnologyXieZengyanLinJunhuaTanJunShuKunxian(CollegeofBio—information,ChongqingUniversityofPostsandTelecommunications,Chongqing400065)Abstract:Asthecommonlyusedtechnologyinmolecularbiology,DNAsequencingtechnologyhasseengreatadvance
3、sinmorethanthirtyyearssince1977.Next-generationDNAsequencingtechnology,characterizedbyhigh-throughput,hasenteredthemarketandbeengrowingtomaturity.Thethird-generationsequencingtechnologyhasalsoarisen,whichcansequencesingleDNAmoleculars.Inthisreview,weintroducedthreegenerationsofsequencingtechnolo
4、giesandemphasizedonthesecond—generationsequencingtechnolo-gYanditsapplications.Attheendofthereview,theeffectofnewDNAsequencingtechnologiesonresearchandmedicinewerepre-viewed.Keywords:First—generationDNAsequencingtechnologySecond—generationDNAsequencingtechnologyThird·generationDNAsequencingtechn
5、ologyHigh-throughputSingle—molecularsequencingtechnology.DNA测序技术是分子生物学研究中最常用的技术,它的出现极大地推动了生物学的发展。成熟的DNA测序技术始于20世纪70年代中期。1977年Maxam和Gilbert¨。报道了通过化学降解测定DNA序列的方法。同一时期,Sanger。t发明了双脱氧链终止法。20世纪90年代初出现的荧光自动测序技术将DNA测序带入自动化测序的时代。这些技术统称为第一代DNA测序技术。最近几年发展起来的第二代DNA测序技术则使得DNA测序进入了高通量、低成本的时代。目前,基于单分子读取技术的第三代
6、测序技术已经出现,该技术测定DNA序列更快,并有望进一步降低测序成本,改变个人医疗的前景。现介绍DNA测序技术的发展历史及不同发展阶段各种主要测序技术的特点。1DNA测序技术的出现早在DNA测序技术出现之前,蛋白质和RNA的测序技术就已经出现。1949年,FrederickSan.ger一。开发了测定胰岛素两条肽链氨基末端序列的技术,并在1953年测定了胰岛素的氨基酸序列‘4jo。Edman‘61也在1950年提出了蛋白质的N端测序技术,后来在此基础上发展出了蛋白质自动测序技术一。。Sanger等‘8。在1965年发明了RNA的小片段序列测定法,并完成了大肠杆菌5SrRNA的120个核
7、苷酸的测定。同一时期,Holley∽’101完成了酵母丙氨酸转运tRNA的序列测定。收稿日期:2010-02.02基金项目:重庆邮电大学博士启动金(A2009-18)作者简介:解增言,男,博士,讲师,研究方向:生物信息学;E-mail:zengyanxie@gmail.corn万方数据2010年第8期解增言等:DNA测序技术的发展历史与最新进展65DNA测序技术出现的较晚。1975年Sanger和Coulson¨¨发明了“加减法”测定DNA序列
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