人源性细胞膜穿透肽hcpp10穿透血脑屏障的实验研究

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1、分类号R6密级公开UDC硕士学位论文人源性细胞膜穿透肽hCPP10穿透血脑屏障的实验研究学位申请人：王涛学科专业：外科学指导教师：张光辉教授柳长柏教授二○一三年五月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineExperimentalstudiesofhumanCell-PenetratingPeptidehCPP10penetratestheBloodBrainBarrierGrad

2、uateStudent:WangTaoMajor:SurgerySupervisor:Prof.ZhangGuanghuiProf.LiuChangbaiChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMay2013三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均

3、已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的

4、一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：I三峡大学硕士学位论文内容摘要目的：研究自主鉴定的人源性细胞膜穿透肽hCPP10能否通透SD大鼠血脑屏障、在脑内分布的差异及其对细胞活力的影响。方法：(1)荧光显微镜下检验His-hCPP10-GFP穿透SD大鼠血脑屏障的能力；(2)荧光显微镜下检验His-hCPP10-GFP在SD大鼠脑内分布的差异；(3)MTT法比较His-hCPP10-GFP和His-TAT-GFP对细胞活力的影响。结果：(1)成功获得His-hCPP10-GFP、His-TAT-GFP及His-G

5、FP融合蛋白；(2)SD大鼠体内检测到His-hCPP10-GFP能够有效通透血脑屏障；(3)SD大鼠体内检测到His-hCPP10-GFP通透血脑屏障后主要聚集于大脑皮质、基底节、海马回及脑室周围等区域；(4)MTT法分析发现His-hCPP10-GFP对细胞活力的影响远低于His-TAT-GFP。结论：人源性细胞膜穿透肽hCPP10能够有效通透血脑屏障，通透血脑屏障后主要聚集于大脑皮质、基底节、海马回及脑室周围等区域，并且其对细胞活力的影响远低于TAT。关键词：人源性细胞膜穿透肽血脑屏障II三峡大学硕士学位论文

6、AbstractObjectiveTostudywhetherthesynthesizedhumancellpenetratingpeptidehCPP10canpermeatetheblood-brainbarrier,theirdistributiondifferencesinSDratbrainandtheireffectsonthecellviability.MethodsWetestwhetherHis-hCPP10-GFPcanpenetratethebloodbrainbarrierofSDratsu

7、nderfluorescencemicroscope;wetestthedistributionofhis-hCPP10-GFPinSDratbrainalsounderfluorescencemicroscope;wecomparetheeffectsoncellviabilityofHis-hCPP10-GFPandHis-TAT-GFPbyMTT.Results(1)TheacquiredofthefusionproteinHis-hCPP10-GFP,His-TAT-GFPandHis-GFP;(2)the

8、His-hCPP10-GFPwasdetectedcaneffectivelypenetratesblood-brainbarrierinSDrats;(3)theHis-hCPP10-GFPwasdetectedmainlygatheredinthecerebralcortex,basalganglia,hippocampusandperiventricu