neuropilin-1阳性t细胞免疫调节功能的研究

《neuropilin-1阳性t细胞免疫调节功能的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中国人民解放军军医进修学院;中国人民解放军总医院博士学位论文Neuropilin-1阳性T细胞免疫调节功能的研究姓名：裴向克申请学位级别：博士专业：泌尿外科指导教师：石炳毅20080425军医进修学院博士学位论文Neuropilin一1阳性T细胞免疫调节功能的研究中文摘要研究背景：近年来神经菌毛素(Neuropilin一1，Nip一1／NPl／Npn．1)在免疫学领域及肿瘤生物学领域的研究逐渐成为热点。Nrp．1在多种免疫细胞如树突状细胞(Dendriticcells，DC)、T细胞上都有表达，有研究提示Nrp．1可能是经典CD4+CD25+调节性T

2、细胞(CD4+CD25+regulatoryTcells，CD4+CD25+Treg)的新表面标志分子，但Nrp．1+T细胞是否具有免疫调节功能鲜有报道。Nip．1也表达于多种肿瘤细胞上，在肿瘤增殖及扩散等生物学行为中发挥重要作用。由于各种类型的Treg在肿瘤免疫领域中的作用是目前的一个研究热点，以Nrp-l为桥梁将Treg与肿瘤免疫联系起来是值得探索的问题。目的：研究Nrp．1在淋巴细胞及T细胞上的表达特点、Nrp．1+T细胞与经典CD4+CD25+Treg的关系及二者在肿瘤免疫中调节功能的比较，探讨Nrp-1可否作为新的Treg表面标志分子、Nr

3、p一1+T细胞是否一种新的Treg，并对Nrp．1+T细胞在肿瘤免疫中发挥免疫调节作用的机制进行初步分析。方法：利用流式细胞术分析Nrp．1在淋巴细胞及T细胞的表达特点、Nrp—l+T细胞与经典CD4+CD25+Treg的关系；建立小鼠B16一F10一luc．G5黑色素瘤细胞体外培养方法，利用荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸(Carboxyfluoresceindiacetatesuceinimidylester,CFDA—SE)标记肿瘤细胞并利用阻断抗体，经流式细胞术分析Nrp．1及其配体在肿瘤细胞体外增殖中的作用；利用先进的萤光成像技术，在体外实验中研

4、究Nrp．1+T细胞对自然杀伤细胞州anmlkillercells，NK细胞)杀伤小鼠黑色素瘤细胞的免疫调节作用，并与经典CD4+CD25+Treg进行比较，在体内实验中(肿瘤模型)，研究Nrp—I+T细胞在小鼠黑色素瘤肿瘤免疫中的调节作用。结果：小鼠脾脏淋巴细胞中，Nip．1+T细胞在CD4+CD25+Treg中所占的比例明显高于在CD4+CD25‘T细胞中所占的比例(P<0．01)，CD4+CD25+Treg在Nrp．1+T细胞中所占的比例明显高于在Nip一1岬r细胞中所占的比例俨

5、进修学院博士学位论文体积之间呈良好线性相关；Nrp．1及血管内皮因子165(Vascularendothelialgrowthfactor165，VEGFl65)被阻断后，小鼠B16．F10一luc．G5黑色素瘤细胞增殖指数下降，与非阻断组相比有极显著差异(P

6、量与功能上关系密切而又不同的新的T细胞亚群；体外／体内萤光成像检测均操作简便、效果直观、结果可靠。Nrp．1及VEGFl65均能促进小鼠B16．F10．1uc．G5黑色素瘤细胞的增殖；Nrp．1+T细胞在体内及体外均能抑制针对小鼠B16．F10一luc．G5黑色素瘤细胞的免疫反应，这种负性免疫调节功能比经典CD4+CD25+Treg更强，其作用机制可能通过Nrp．1+T／效应性T细胞(EffectiveTcells，"ref0、Nrp-1+T／NK、Nrp—l+T／DC及Nrp-1+T／肿瘤细胞直接作用有关。Nrp．1可以作为Treg新的表面标志分子

7、，Nrp一1+T细胞可能是一种新的Treg亚群，其负性免疫调节作用机制具有多样性。关键词：Neuropilin-I，调节性T细胞，免疫调节，肿瘤免疫军医进修学院博士学位论文StudyonImmunoregulatoryFunctionofNeuropilin一1PositiveTCellsAbstractBackground：Neuropilin—l(Nrp一1／NPl／Npn-1)graduallybecomesonehotspotinimmunologyandoncobiologyinrecentyears．Nrp一1hasbeenfoundto

8、beexpressedonsomeimmunocytessuchasDC(DendriticCells)an