人脐血内皮祖细胞的分离、培养和鉴定及改良冻融法脱细胞血管支架的建立

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1、硕士学位论文人脐血内皮祖细胞的分离、培养和鉴定及论文题目:改良冻融法脱细胞血管支架的建立Humanumbilicalcordbloodendothelialprogenitorcellswereisolated,culturedandidentifiedandimprovedfreeze-thawmethodofftheestablishmentofcellstent研究生姓名:曹程程指导教师:张莉教授学科专业:外科学研究方向:整形外科论文工作时间:2012年5月至2013年3月1学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的

2、学位论文是本人在导师指导下独立进行实验研究工作所取得的成果，本论文中不包含其他人已经发表或已经获取得的研究成果。在本论文撰写中所引用其他研究者的研究内容和成果时已在论文中给予特别标注和明确说明。对本论文的实验研究以及论文撰写过程中给予帮助和建议等贡献的其他人士，也已作了致谢说明。本人完全理解本声明的法律责任，以及所涉及的结果将由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日关于学位论文著作权的共享声明根据《中华人民共和国著作权法》和《高等院校知识产权管理条例》，本学位论文，题目：人脐血内皮祖细胞的分离、培养和鉴定及改良冻融法脱细胞

3、血管支架的建立，是研究生在导师指导下完成的职务作品，得到蚌埠医学院相关部门科室的物质技术和经费支持，因此，本学位论文的著作权由研究生，导师和蚌埠医学院三方共同享有，均享有署名权和使用权等权益；本学位论文成果归属蚌埠医学院。根据国家学位授予条例，学校对本学位论文有使用权，包括保存本学位论文；因教学和科研的目的，保留在图书馆被查阅或借阅；学校可根据国家规定将本学位论文送交国家有部门保留和使用。学校在公布本学位论文的全部或部分内容时，应保障研究生和导师的署名权等权益。研究生和导师在公开发表本学位论文的全部或部分内容时必须保障学校的

4、署名权等权益，即在发表论文时蚌埠医学院及相关部门科室应署名为作者单位。声明人完全理解本声明的法律责任。研究生签名：导师签名：日期：年月日2人脐血内皮祖细胞的分离、培养和鉴定及改良冻融法脱细胞血管支架的建立中文摘要血管疾病是目前全球发病率最高的疾病之一，可由动脉粥样硬化、创伤、血管瘤以及各种先天性异常等因素引起，而主要治疗方法与手段是血管移植术。据统计，在美国每年欲进行移植血管行动脉旁路术就高达10万例以上。因此，如何进一步扩大血管移植物的有效来源已经成为人们高度关注的重要课题。目前，血管移植物的临床来源，主要是异体或自体血管

5、以及人工材料，虽然这些材料可以为诸多的病患进行修复血管提供有利的条件，甚至可以更好地延长病患的生命，但是远期效果却未达到预期的理想程度。由于异体或是自体血管的移植分别存有组织相容性比较差，而自体动脉来源也有一定的限制等问题。而人工材料的应用也存在着一定的问题，小口径(内径小于6mm)的血管移植过程之中血管存在着不同程度的高张力、低血流的特殊状态，在病患进行移植之后，其失败率也较高。与此同时，这些人工血管不具备生长以及自我修复功能。近年来，随着科学技术的迅速发展与进行，组织工程学以分子生物学、生物工程学以及细胞生物学、临床医学

6、为基础，通过生命科学与工程学的基本原理和方法，通过科学、有效的设计、构造、培育以及保养活组织等手段，用以修复或重建病患的相关组织器官的结构，并成为了维持或改善病患组织器官功能的边缘科学。而通过利用该项科学技术，有效地将血管种子细胞与相应的支架材料加以有机结合，则有希望构建出更为理想、有效的组织工程化血管，不但具有较好的与受体组织相容性、还可以维持管腔的长期通畅率，同时还具有良好的自我修复能力以及耐久性、可塑性等优势特性。组织工程血管，通常是利用细胞外基质作为血管支架，充分、有效地运用组织工程技术，将人工培养的血管内皮细胞种植

7、于血管支架上，再通过相关的技术手段，使之黏附、分化以及正常生长，同时分泌出ECM，从而构建出组织相容性较为良好、无免疫原性、更具较好的持久性与可塑性，且不易钙化、感染、避免血栓形成的、具有生命力的血管替代物。[1]Herring等最早地进行了相关人工血管接种血管内皮细胞报道，经过不断3的研究也获得了初步成功。然而，由于构建组织工程血管需极大数量的种子细胞，就目前来讲，胚胎干细胞、脂肪干细胞髓干细胞等来源的干细胞均存有不同程度的制约因素，这也促使加强细胞自身的增殖能力，并在较短的时间之内获得更多的种子细胞的问题，也成为了诸多学

8、者所关注的研究课题。尽管，组织工程种子细胞目前主要来自血管壁细胞、内皮祖细胞、骨髓间充质干细胞以及胚胎干细胞，而内皮祖细胞却具有更多的优点，从而被诸多学者认为内皮祖细胞是构建组织工程血管过程中的最佳种子细胞来源。而支架材料的研究是组织工程血管的另一重要组成部分。组织工程血管要求支架必须具有