大鼠视网膜müller细胞在机械牵张下基因变化的研究

《大鼠视网膜müller细胞在机械牵张下基因变化的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据复旦大学博士学位论文大鼠视网膜MOiler细胞在机械牵张下基因变化的研究GeneExpressionChangesunderMechanicalStretchinginRatRetinalMfillerCells博士研究生：王鑫博士生导师：徐格致教授导师组成员：樊嘉雯博士复旦大学附属眼耳鼻喉科医院2014年3月万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．7日Ⅱ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．7正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8第—部分持续性机械牵张作用下大鼠视网膜Mfiller细胞MMP．2表达变化的研究⋯⋯⋯．8杓奉晦方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．18讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．

3、．22第二部分周期性机械牵张作用下大鼠视网膜Miiller细胞全基因组表达变化的研究⋯⋯．．23捌帖方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．34讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．54全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯56参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57附勇专⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．60附表l⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60附表2⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．100结进⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．168在读期间发表论文及获奖情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯174致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯]75万方数据缩写MMP2ELlSAP／sMW中英文缩略语英文名称中文名称

5、Matrixmeta¨oproteinase-2基质金属蛋白酶2enzymelinkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附剂测定Penicillin·Streptomycinmolecularweight青霉素／链霉素分子量万方数据复旦大学博士学位论文大鼠视网膜MLiller细胞在机械牵张下基因变化的研究中文摘要视网膜在很多疾病状态下都会受到力的牵张作用，比如病理性近视，玻璃体后脱离，增殖性玻璃体视网膜病变等。这些力的牵张作用，在疾病的病理生理过程中扮演重要角色。MQIler细胞作为视网膜中主要的胶质细胞，对维持神经元的稳态

6、和代谢平衡都有非常重要的作用，几乎参与各种视网膜损伤和疾病过程。已经有研究初步提示MQIler细胞在生物力的牵张作用下有一系列细胞生物学效应。但其具体的分子生物学效应及在视网膜疾病发病机制中的作用还有待进一步深入研究。本研究通过观察MQIler细胞，在持续性机械牵张作用下基质金属蛋白酶2(Matrixmeta¨oproteinase．2，MMP2)基因和蛋白水平的变化；在周期性机械牵张作用下全基因组的变化，进一步揭示了MQIler细胞复杂的生物力学效应，为解释和进一步研究众多有视网膜受力的视网膜疾病的分子生物学机制提供了新的思路。目的方法

7、结果第一部分持续性机械牵张作用下大鼠视网膜MiJller细胞MMP．2表达变化的研究观察持续性机械牵张对大鼠视网膜MQIler细胞MMP．2分泌的影响。原代培养sD大鼠M(iller细胞，选取2．3代生长良好的细胞种到底部由弹性硅胶膜组成细胞培养板中，给予幅度为15％，持续时间为24h的持续机械牵拉。用Real．timePCR，Westernblot分别检测M(iller细胞胞内MMP．2基因和蛋白的表达变化，用Westernblot和ELISA检测分泌至MQIler细胞培液中MMP-2的含量，用凝胶酶谱检测培液中有活性的MMP．2的含量

8、。MQIler细胞经过24h牵拉，胞内MMP一2的mRNA和蛋白水平有明显提高，胞外MMP．2总蛋白及其活性形式的含量亦有明显增加。】万方数据复旦大学博士学位论文结论持续性机械牵张能够促进Mc