t-2毒素抑制gh3细胞生长激素合成与分泌的基因组和蛋白组研究

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1、分类号:华中农业大学硕士学位论文密级T-2毒素抑制GH3细胞生长激素合成与分泌的基因组和蛋白组研究The。ofgandproteinsthes3,1eexpressmnoggenesandproteiUSonthesvnthesisandsecretionofgrowthhormoneinGH3cellstreatedwithT-2toxin硕士研究生:林萍萍学号指导教师:指导小组:2010302110120袁宗辉教授王旭副教授戴梦红。副教授专业:基础兽医学研究方向:兽医药理学及毒理学获得学位名称:农学硕士获得学位时间:2013年6月华中农业大学动物科技学院动物医学院二。一三年

2、六月课题来源:承担单位:国家重点基础研究发展计划(973)项目(No。2009CBll8800):畜禽产中有害物质形成原理与控制途径研究国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文如需保密,解密时间是否保密否独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明

3、,并表示了谢意。研究生签名:禽随藩时间:如B年8月,午日学位论文使用授权书本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版,并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容,同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。注:保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论文)在解密后适用于本授权书。学位论文作者签名:布陇碑导师签名:彩云飞分I签名日期:伽哆年g

4、月l中日签名日期:讪1捧9月1争日———————!兰垩堕塑型翌9塑羔!!咝篓邀壅全璧坌鲨塑垄里塑塑堡皂塑堂堑塞目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯lAbstract⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯。。⋯..⋯⋯⋯.⋯⋯⋯。⋯。.⋯⋯⋯⋯⋯,⋯.。⋯⋯⋯...⋯⋯⋯.⋯一4缩略语表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..8I前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l1.1立题依据⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..111.2国内外研究现状与发展趋势⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯..111,2.1"1"-2毒素的化学组成及危害⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111.2.2单端孢毒素抑制生长的机理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131.2.3T-2毒素毒性机制的研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..15l3目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..172.1细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.172.2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..172.3主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一182.4主要溶液的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一192.5细胞培养及冻存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一222.6MTT筛选对GH3细胞毒性最大的单端孢毒素⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222.7毒素作用合适浓度和时问测定(ELISA方法检测生长激素浓度)⋯⋯⋯⋯⋯232.7.1待测样本准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.232.7.2操作步骤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.232.8毒素作用差异基因的检测(基因芯片)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242.8.1样

7、品RNA的抽提(TRIZOL法)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯,242.8.2eDNA第一链和第二链一步法合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一262.8.3荧光标记cRNA合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262.8.4荧光探针纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272.8.5芯片杂交⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272.8.6芯片洗涤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28华中农业奎堂三!!!.厘.堡主堕茎生堂篁堕茎.———————

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