解淀粉芽孢杆菌x-278生物片剂的研制及田间试验

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1、万方数据分类号：密级：S476+．9单位代码：!QQ墨鱼学号：2Q!!三鱼墨解淀粉芽孢杆菌X一278生物片剂的研制及田间试验BacillusamyloliquefaciensX--278biologicaltabletsdevelopmentandfieldexperimentofbiological学位申请人：魏娇洋指导教师：赤国彤教授刘大群教授学科专业：农药学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一四年五月二十八日万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取

2、得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑耋垦盔些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名魂饼净签字R期：w／垆钿／日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逦j量壅些太堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑皇堡垒些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编

3、入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：孤饼诨签字同期：-∽／Lt年(月f同学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：导师签名签字日期电话：邮编：月f同万方数据摘要内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamylo脚uefaciens)X．278分离自辛集市棉阳健康棉株，室内和FR问药效试验证明，该菌对棉花黄萎病有很好的防治效果并且具有一定的促生作用。内生解淀粉芽孢杆菌X一278有很好的定殖能力，在根内最高定殖量达2．3×

4、105cfu／g，在茎内最高定殖量达1．6×105cfu／g，接种35d后仍有很好的定殖能力。内生解淀粉芽孢杆菌X．278室内对棉花黄萎病的防效高达59．49％，显著提高籽棉产量达53．46kg／亩。通过对X．278菌株脂肽抗尘素的薄层层析分析，证明该菌中含有闭合肽键类的物质，其中有的组分与相对迁移率Rf和标样surfactin非常相近；X．278菌株脂肽抗生素的高效液相色谱(HPLC)研究表明，X．278菌株脂肽抗生素中含有保留时间与surfactin相似的成分。棉花是我国很多地区的主要农作物，关系到当地的经

5、济发展。棉花黄萎病对棉花危害较大且发生较多的病害，能极大的影响棉花的产量和质量。生物防治是目前防治土传病害最有效环保的方法，因此利用拮抗微生物防治棉花黄萎病是比较有发展前景的防治方法。我国在微生物农药剂型方面的研究远差于发达国家，为了研究生物农药新剂型，提高生物农药的储存期限，延长其使用寿命，保持其在生产实践中的防治效果，本研究以对棉花黄萎病具有很好防治效果的解淀粉芽孢杆菌X．278为研究对象，并在前期研究的基础上，对X．278摇瓶发酵培养基及发酵条件进行优化，研制了一种在根部使用的微生物片剂，检测该片剂的指标

6、及F日问应用效果。获得的主要研究成果如下：1、以内生解淀粉芽孢杆菌X．278为研究对象，采用单因素和双指标J下交试验，通过比较抑菌圈及OD600。m，对其液体发酵培养基及发酵条件进行了优化。得到的内生解淀粉芽孢杆菌X．278最适培养基的各组分最佳配比为：葡萄糖1．5％、花生饼2％、硫酸铵O．5％、碳酸钙0．1％、硫酸镁O．5％、氯化钠O．5％；最佳发酵培养条件为初始PH7，培养温度：34℃，转速180r／min，种龄为24h，500mL的三角瓶中装液量为150mL，发酵培养基的接种量为2％，发酵时间为72h。优

7、化后得到的发酵液中活菌数达到1．5x1010cfu／mL，对棉花黄萎病的抑菌圈为33．4mm。2、通过对不同载体、营养成分(碳源和氮源)及粘合剂的筛选，研制出了一种便于储存和运输、并可在棉花根部施用的解淀粉芽孢杆菌X．278(以下简称X一278)片剂，并且检测该生物片剂的各项指标，该生物片剂的主要成分为：以硅藻土为载体，以质量分数为15％的葡萄糖为碳源，以质量分数为30％的花生饼为氮源，20％的淀粉浆为粘合剂，通过干法压片得到了外观完整、光洁，色泽均匀且具有一定稳定性的X．278片剂，其含水量(质量分数)为O．

8、5％，菌含量为7．4×107cfu／g，未检测到有其他杂菌存在；一20---37℃保存200d，均能保持很好的稳定性，其中在28℃下保存时稳定性最好。片剂的各指标都符合标准。研制的微生物片剂具有成型性好、工艺简单、省时省力、易于贮存、运输安全等优点。3、采用利福平标记法测定了X。278在棉花根、茎及土壤中的定殖能力。采用随万方数据机区组设计进行田间试验，研究了解淀粉芽孢杆菌X一278微