叶黄素对h2o2诱导的人视网膜müller细胞氧化应激损伤的干预作用及机制研究

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1、万方数据AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterInterventionalEffectofLuteinagainstOxidativeStressInducedbyH202onMijllercellanditsMechanismByXuYangSupervisor：Prof．MingchenWangandYuzhouBaoDepartmentofBiochemistryandMolecularBiologyBasicMedicalCollegeMay2014万方数据原创性声明本人郑重声明：所呈交

2、的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：卉易倍日期：仍峥年6月7乡日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印

3、或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：书雄日期：矽咋年6月憎日万方数据摘要叶黄素对H202诱导的人视网膜Mo

4、ler细胞的氧化应激损伤的干预作用及机制研究研究生：杨旭导师：王明臣鲍玉洲郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河南郑州450001背景氧化应激是年龄相关性黄斑变性的主要病因之一。叶黄素对年龄相关性黄斑变性的防治有重要作用，但是其抗氧化机制仍不明确。目的研究不同浓度的叶黄素对H202诱导的视网膜Mtiller细胞

5、氧化应激损伤的干预作用及机制研究。方法以对数生长期的人视网膜Miiller细胞为研究对象，绘制不同浓度过氧化氢作用下MUlle蜘胞的生长曲线，取H202的半数致死率浓度，RPl60wnol／L。用常规培养的Mfiller细胞作为空白组，1609mol／LH202作用的Mtiller细胞作为对照组，不同浓度(12．5，25，50mg／L)叶黄素和1609mol／LH202作用的Miiller细胞作为实验组，加入培养基培养24h，MTT比色法测定不同浓度叶黄素和H202对Miiller细胞的活性影响；流式细胞仪检测各组的活性氧簇(Reactiveoxygenspecies，

6、ROS)含量；采用实时荧光定量PCR的方法检测各组Miiller细胞核因子2相关转录因子2(NF．E2．relatedfactor2,Nrf2)、血红素加氧酶．1(hemeoxygenase．1，HO．1)和Caspase．3的mRNA含量；用WesternBlot方法检测各组Mtiller细胞胞浆Nrf2、胞核Nrf2、HO．1和Caspase．3的蛋白表达情况。结果MTTEl',色法检测显示，各组细胞活性比较差异有统计学意义(尸<0．05)。与对照组相比，实验组细胞活性均明显升高，但低于空白组，差异有统计学意万方数据摘要义(尸<0．05)。叶黄素浓度与细胞活性呈正相

7、关；流式细胞术结果显示，各组细胞的ROS含量比较差异有统计学意义(尸<0．05)，与对照组相比，实验组的ROS含量低于对照组，高于空白组，差异有统计学意义(尸

8、均低于对照组，高于空白组，差异具有统计学意义(尸<0．05)，且随着叶黄素浓度增加，Caspase．3含量逐渐减少；WesternBlot结果表明，各组Miiller细胞胞浆蛋白中Nrf2的含量各组均无显著性差异(尸>O．05)，各组Miiller细胞HO．1、Caspase．3和核蛋白中的Nrf2，比较差异有统计学意义(尸<0．05)，实验组的HO．1和核蛋白中的N也蛋白含量高于对照组，叶黄素浓度与HO．1和核蛋白中的Nrf2蛋白含量呈正相关，实验组的Caspase．3蛋白含量低于对照组，叶黄素浓度与Caspase．3蛋白含量呈负相关。