分光光度法测定高浓度培养液下的产油酵母菌生长曲线

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1、·生物技术·北方园艺2013(08):116~118分光光度法测定高浓度培养液下的产油酵母菌生长曲线马勇,图雅,陈秀莉,门中华(包头师范学院生物科学与技术学院,内蒙古包头014030)摘要:采用分光光度法测定酵母菌不同生长时间高浓度培养液的OD600值,并对不同生长时间高浓度培养液进行相应倍数的稀释,使用建立OD600值回归方程的方法,利用回归后的OD600值绘制出产油酵母菌Y1的生长曲线。结果表明:所得到的生长曲线可以准确反应菌体的生长规律。酵母菌Y1在适宜生长条件下菌体细胞生长出现4个阶段:延滞期、

2、对数期、稳定期和衰亡期,其中,0~4h为延滞期,4~24h为对数生长期,24~68h为稳定期,68h以后进入衰亡期。该研究旨在为相关研究人员提供类似问题的详细解决办法和重要参考。关键词:产油酵母;分光光度法;生长曲线;回归方程中图分类号:Q943.1文献标识码:A文章编号:1001-0009(2013)08-0116-03我国人均石化资源贮量十分有限,而能源需求量却光度法测定酵母菌不同生长时间高浓度培养液的OD600与日俱增。微生物油脂是石化能源替代品生物柴油的值,并对不同生长时间高浓度培养液进行相应倍

3、数的[1]潜在油源。由微生物生产富含多种生理功能的不饱稀释,使得稀释后的培养液所测得的OD600值均保持在[3]和脂肪酸油脂已引起国内外的广泛重视。因此,微生物0.1~0.8之间,然后建立相关稀释倍数间的OD600值[2]油脂的研究将成为新世纪油脂工业的一个发展方向。回归方程,使所有实际测得的OD600值均回归到同一稀在进行产油酵母的研究中,能够准确测定所使用菌种的释倍数所表现的回归后OD600值,最终确定了其生长生长量以及后期测定所用菌种的生长曲线,对于了解所曲线。用菌种以及后期的发酵产脂培养是十分重

4、要的一项生1材料与方法[3]理指标。生长曲线反映了酵母菌在培养过程中的生1.1试验材料长和繁殖的规律,同一种酵母菌因研究方法不同其生长供试菌种为产油酵母菌Y1,由包头师范学院生物[3]曲线也不一样。通过测定酵母菌的生长曲线,了解其科学与技术学院实验中心保藏。生长繁殖规律,这对根据不同的需要,有效地利用和控培养基:YEPD液体培养基(g/L):1L培养基中含[4]制酵母菌的生长具有重要的意义。葡萄糖20g,酵母粉10g,蛋白胨10g;液体种子培养基该研究对实验室保藏的1株产油酵母菌,通过分光(g/L):1

5、L培养基中含葡萄糖20g,(NH),42SO45gKH2PO41g,酵母粉0.5g,MgSO4·7H2O0.5g。第一作者简介:马勇(1980-),男,辽宁台安人,在读博士,实验师,1.2试验方法现主要从事微生物油脂及植物生理与农作物基因工程等研究1.2.1酵母菌Y1种子液的培养取活化后斜面酵母工作。菌Y1一环,接种于100mL液体YEPD培养基中,28℃责任作者:门中华(1975-),男,内蒙古包头人,博士,副教授,硕士180r/min培养14h,备用。生导师,现主要从事植物生理生态学及分子生物学等研

6、究工作。基金项目:国家自然科学基金资助项目(31160254);包头师范学院1.2.2酵母菌Y1不同生长时间培养液收集取20个青年科学研究基金资助项目(BSYKJ2011-17)。100mL已灭菌的三角瓶分别装入25mL液体种子培养收稿日期:2012-12-13基,标签编号,其中1个标注为CK,另外将19个三角瓶wasMSbasalmediumcontaining6g/Lsucrose,4.0g/Laga

7、rpowderand10g/Lmannitesupplementedwith2.0mg/LCCC,2.0mg/LPP333and2.0mg/LABA,inanilluminatedchambrunder14~16hphotoperiodof1500lxlightintensityat20℃,morethan50%conservationmaterialsurvivedafter300days,mostofthemcouldgrewwellonpropagationmedium,andthechromos

8、omenumbermaintainedstably.Keywords:ZingiberofficinaleRosc.;germplasmresource;invitroconservation;growthrecovery;geneticstability116北方园艺2013(08):116~118·生物技术·从0~72h,每间隔4h,分别标明培养时间。分别向已过程中共做5次稀释,稀释倍数分别为2、10、20、30、50,装入液体种子培养

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