基于体内过程的蒲黄—五灵脂药对功效物质基础研究

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1、分类号B2墨窆：竺UDC615密级垒五编号!Q2璺壁墨!!15Q23@江薛大擎硕士学位论文基于体内过程的蒲黄．五灵脂药对功效物质基础研究StudyontheBioacfiveComponentsBasisofPuhuang-Wulingzhi／nVivo．指导教师眍豳臻教授蜜挝兰堂援一作者姓名蘸莲申请学位级别亟±学科(专业)生药堂论文提交日期20141513论文答辩日期2Q!垒!鱼!墨学位授予单位和日期江菱太堂2Q!生鱼答辩委员会主席工塞佳麴撞评阅人独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外，本论文不包含任何其他

2、个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：黼D斗年6月哆日学位论文版权使用授权书IIIIIIlUlIIIIlllIIIIY2538352江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中

3、国学位论文全文数据库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生处办理。本学位论文属于不保密口。学位论文作者签名：诲牟》l毕年6刖弓日指导教师签名》件年6月f弓日江苏人学硕士学位论文摘要蒲黄．五灵脂药对始载于《证类本草》卷二十二引《近效方》，称为失笑散，是由蒲黄、五灵脂两味中药组成，具有活血化瘀消结止痛的功效。主治瘀血停滞症；心腹刺痛，产后恶露不行，或月经不调，少腹急痛等。蒲黄一五灵脂药对为治疗瘀血疼痛的常用方，临床上主要用于治疗由于血瘀症引起的相关病症，在妇科疾病中疗效尤

4、其显著。现代研究表明，蒲黄一五灵脂药对的有效成分主要有甾类、黄酮、多糖、有机酸、萜类、氨基酸、挥发油等，并具有安神、止痛、抗血小板聚集、抗动脉粥样硬化等药理作用。本论文以蒲黄一五灵脂药对为研究切入点，对蒲黄一五灵脂效应物质群在动物体内过程进行研究，针对其效应成分群、药代动力学和组织分布特征、动物体内的代谢产物鉴定与分析以及效应成分群对ADP诱导的血小板聚集和抗凝血作用等方面开展研究工作，以探讨其体内直接药效物质与作用机制，为了进一步研究它的作用机理和其治疗疾病的物质基础，揭示其临床治疗疾病的作用机理提供科学依据。为临床合理用药提供一定参考。全文主要研究内容和结论如下：1．蒲黄．五灵脂药对配

5、伍前后效应成分群的高效渡相色谱一二极管阵列检测器(1口LC．PDA)分析。采用HPLC—PDA法同时分析测定样品中没食子酸、原儿茶酸、香草酸、对香豆酸、香蒲新苷和异鼠李素．3．0-新橙皮糖苷的含量，结果表明，蒲黄、五灵脂配伍后香蒲新苷、异鼠李素一3—0．新橙皮糖苷溶出增加，均高于蒲黄单煎液和单煎混合液；而没食子酸、原儿茶酸、香草酸、对香豆酸4个有机酸类成分经配伍后溶出量低于单煎液，但高于单煎混合液。以评价蒲黄．五灵脂配伍前后化学成分的溶出变化为进一步体内过程研究提供方法参考。2．超高液相色谱飞行时间串联质谱仪(UPLC．QTOF-MS-Markerlynx)联用技术分析蒲黄．五灵脂药对效应

6、成分群。应用UPLC—QTOF-MS．Markerlynx联用技术及主成分分析法(PcA)和正交偏最小二乘判别法进行数据分析，对蒲黄五灵脂合煎液、合并液中的主要化学成分进行分析，追踪煎煮过程化学成分的变化，从化学成分变化的角度阐述二者配伍的科学内涵。结果表明，蒲黄一五灵脂配伍分煎混合液与合煎液总离子流色谱峰存在显著差异，对有变化的碎片离子峰进行分析鉴定，共鉴定出5具有显著差异的化合物，分别为香蒲新苷、柚皮素、异鼠李素一3一口芸香糖苷，槲皮素．3．D_新橙皮糖苷，山柰酚一3一D-新橙皮糖苷。提示经合煎后可能会促进该药对中的黄酮类成分的溶出。存在较大差异的色谱峰尚基于体内过程的蒲黄．五灵脂药对

7、功效物质基础研究包括五灵脂中的成分，其化学结构的确认尚需进一步研究。3．蒲黄五灵脂药对主要效应成分群的药代动力学研究及组织分布特征分析。采用超高效液相色谱串联三重四级杆质谱法(UPLC—TQ／MS)建立了同时测定蒲黄五灵脂水提取物中对香豆酸、香草酸和香蒲新苷3种主要成分在血浆中的定量分析方法，该方法具有高选择性、高灵敏度、精密准确。药动学结果说明，单味药蒲黄组中香草酸、对香豆酸Cmax、AucM低于蒲黄一五灵脂合煎组(P