蛋白质组分析条件的优化与弱精症患者精液比较蛋白质组学研究

《蛋白质组分析条件的优化与弱精症患者精液比较蛋白质组学研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、重庆医科大学硕士学位论文蛋白质组分析条件的优化与弱精症患者精液比较蛋白质组学研究姓名：彭咏波申请学位级别：硕士专业：药物化学指导教师：邱宗荫;夏永鹏20080501重庆医科大学硕士研究生学位论文英文缩写A595ACN符号说明英文名称absorbaliceat595nmacetonitrile中文名称595nm吸光度乙腈APammoniumpersulfate过硫酸铵BSACAH2BOVINbovinesel'umalbumin牛血清白蛋白bovinecarbonicanhydrase．2牛碳酸酐酶2CDC25AM-phaseinducerph

2、osphatase1CHAPSCHCA2．DED1vrEDHlESIGluHsp70sKCLl3-【(3一cholamidopropyl)dimethylammonio]··1··propanesulfoa-cyano·-4··hydroxycinnamicacid有丝分裂诱导磷酸酯酶13一【(3-胆酰胺基丙基)．二甲胺基】丙磺酸赫Q．氰基．4．羟基肉桂酸twodimensionalgelelectrophoresis双向凝胶电泳dithiothreitoltestilin(EH··domain··containingprotein1)ele

3、ctrosprayionizationglutamicacidhumanshockprotein一70kinesinlightchain1二硫苏糖醇EH结构域包涵蛋白1电喷雾离子化技术谷氨酸人热休克蛋白70驱动蛋白轻链lIPGimmobilizedpHgradient固相pH梯度matrix‘assistedlaseresorption／ioniz基质辅助激光解吸飞MALDl-TOF-Msati。n·time。fflightmaSs行时I’日J质谱spectrometryl重庆医科大学硕士研究生学位论文PAGEPBSPMFPMSFPSMASD

4、STFApolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳phosphate-bufferedsalinepeptidemassfingerprinting磷酸缓冲液肽指纹图谱phenylmethan—sulfonylfluorid苯甲基磺酰氟Prostate-specificmembraneantigen前列腺特异表面抗原sodiumdodecylsulphate-polyacrylamidet“fluoroaceticacid2十二烷基硫酸钠三氟乙酸重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是

5、我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：』雌日期：皇丝塑季!业学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论

6、文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅．学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：日期：重庆医科大学硕上研究生学位论文蛋白质组分析条件的优化与弱精症患者精液比较蛋白质组学研究·摘要目的优化基于MALDI．TOF．MS的蛋白质组分析条件，研究弱精症患者与正常生殖能力者精液中精子和精浆蛋白质表达差异，探讨弱精不育机制。方法在优化蛋白质组分析条件时，选取对蛋白组研究结果有较大影响的MALDI．TO

7、F．MS分析条件、数据准确度、搜索引擎采用、数据库选择以及主要参数设置进行考察，用BSA数据来建立标准参数模型，以CAH2BOVIN、Hsp70s数据为训练对象检验标准参数，最后获得优化的蛋白质分析条件。在弱精症患者精液比较蛋白质组学研究中，收集临床上确认的弱精症精液样本，分别制备精子和精浆；采用2-DE分离／银染检测差异表达蛋白策略进行图谱分析，对差异表达蛋白以胰蛋白酶(trypsin)酶解，肽段混合物经MALDI．TOF．MS鉴定获得PMF数据，MS．Fit数据库搜索，最终获得有关蛋白质的信息。结果l、以BSA质谱数据为研究对象，考察了经

8、MALDI—TOF．MS获得PMF时分析条件及准确度对蛋白质数据库搜索结果的影响。2、以CAH2BOVIN质谱数据为训练集建立模型，然后以人Hsp70s数据进行检验