七叶皂苷钠抗大鼠脑出血后脑水肿作用机制的研究

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1、中国医科大学硕士学位论文七叶皂苷钠抗大鼠脑出血后脑水肿作用机制的研究姓名：谢晓利申请学位级别：硕士专业：神经生物学指导教师：薛一雪20070501中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一

2、切相关责任．论文拓者签名：主坶日期：立啤必中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学．本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文．，，论文作者签名：三皇兰竖塑指导教师签名：盔

3、二聋日期：麴翌。￡：呈·中文论著摘要·七叶皂苷钠抗大鼠脑出血后脑水肿作用机制的研究前言脑出血(ICH)是神经科的常见病和多发病，其脑损伤的病理生理机制还不十分明确，目前仍没有切实有效的治疗方法，因此临床上脑出血所导致的死亡率和致残率仍很高。脑水肿是脑出血后再损伤，病情恶化的主要原因之一，可通过妨碍脑组织的血供和神经细胞内环境的紊乱等加重神经细胞损伤，严重地影响脑出血的预后。研究发现脑水肿与脑出血本身和血脑屏障

4、A)是三萜皂苷的钠盐，是从中国药典收藏的中药婆罗子的干燥成熟果实中提取的。国外由德国药典收藏的生药欧马栗的成熟果实中提取，具有糖皮质激素抗渗出、消肿及对抗磷酸组胺和缓激肽等炎性递质的作用，其作用为氢化可的松的七八倍，而且它还能恢复毛细血管的正常通透性。国内有研究表明：8．七叶皂苷钠注射液(10mg／kg／d)对大鼠急性脊髓损伤有明确的防治作用。本研究旨在通过观察七叶皂苷钠对大鼠脑出血后脑水肿发生时，紧密连接相关蛋白ocdudin和神经胶质原纤维蛋白(GFAP)阳性细胞的作用，进一步为临床治疗提供可靠的理论依据。一、实验材料材

5、料和方法21．实验动物健康雄性Wistar大鼠72只，体重200．2509之间，购于中国医科大学实验动物中心，所有的实验操作过程完全符合NIH(nationalinstituteofhealth)所规定的标准。2．主要试剂注射用七叶皂苷钠；兔抗大鼠oecludin抗体和GAPDH抗体(购于SantaCruz公司)，GFAP抗体(购于北京中山公司)；免疫组化试剂盒及显色剂(购于武汉博士得公司)；ECL试剂盒(购于美国SigmaChemical公司)；其余试剂均为国产分析纯。3．主要仪器大鼠脑立体定位仪；微量迸样器(5叩L)；低

6、温冷冻离心机；透射电镜；紫外分光光度计；自动电泳凝胶成像系统；通用电泳仪；恒温冰冻切片机；MoticImagesAdvanced3．2图像分析系统。二、实验方法1．建立大鼠脑出血模型。2．测定大鼠脑组织含水量。3．病理组织学观察(H&E法)。4．脑出血周围组织超微结构观察。5．免疫组化法检测GFAP阳性细胞。6．Westernblot法检测occludin的表达。7．图像分析Westernblot结果用CherniImager5500V2．03软件对x光胶片进行扫描，用FluorChem2．0软件测取感光区带的IDV值。免疫

7、组化结果用MoticImagesAdvanced3．2图像分析系统采集照片，并进行定量分析。8．统计学分析应用SPSS(statisticalpackageforthesocialscience)统计软件包对数据进行处理。各组实验值以均数±标准差(SD)表示，计量资料两组间与同组间前后比较用Student’St检验，P

8、点两侧脑组织含水量均明显下降。二、病理组织学观察光镜下，脑出血后2411血肿周围可见神经元胞体明显肿胀。少量胶质细胞增生，细胞间隙和血管周围间隙增宽；48．72h上述病交加重，并见大量神经元胞核浓缩，胞质红染加深，细胞间隙出现大量空泡，胶质细胞增生活跃。给予治疗后，血肿周围病变明显减轻：2