金纳多对抗大鼠脑出血后脑水肿的作用机制论文

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1、金纳多对抗大鼠脑出血后脑水肿的作用机制论文杨霄鹏，李秋芳，杨瑞玲【摘要】目的探讨金纳多对抗脑出血后脑水肿形成的作用机制。方法选健康DA)值及血红素氧合酶1(HO1)阳性细胞数。结果除A、B组比较无明显差异外，其余各组间SOD、MDA含量及HO1阳性细胞数比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论金纳多可以抑制血红蛋白所引起的脑水肿。【关键词】金纳多；脑出血；脑水肿；超氧化物歧化酶；丙二醛；血红素氧合酶1Rivalrymechanismofginkgoinratbrainedemaafterintracerebralhemorrhag

2、eABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetherivalrymechanismofginkgoinratbrainedemaafterintracerebralhemorrhage.MethodsTotally80healthyDA)值及免疫组化HO1为指标，观察金纳多对大鼠脑出血后脑水肿的保护作用，旨在为其广泛应用于临床防治脑出血后脑水肿提供理论依据。1材料与方法1.1实验动物河南省实验动物中心提供的健康成年DA试剂盒购自南京生物工程研究所。1.3大鼠尾状核出血模型及对照模型的建立100g/L水合氯醛(2mL/k

3、g)腹腔麻醉后头、股部备皮，络合碘消毒切开右股部皮肤，切口长10mm，剥离暴露股动脉。由股动脉抽取自体血2mL并加肝素抗凝(50u/mL)。3000r/min离心10min，弃去上层血浆及白细胞和血小板，用预冷生理盐水冲洗红细胞3次，移至EP管中离心后置-196℃液氮罐中5min，用37℃水浴至完全解冻，制成自体血红蛋白。将大鼠固定在立体定向仪上，头部正中切开皮肤，长约15mm，30g/L双氧水剥蚀骨膜暴露前后囟门，调节定向仪使前后囟在同一水平面上。于前囟前0.5mm、中线右侧旁开3mm处牙钻钻一直径约1mm的小孔，不伤及硬脑膜。微量注射器

4、抽取50μL自体血红蛋白并固定于立体定向仪上，自钻孔处垂直进针5.5mm，以3-5μL/min速度向C、D组大鼠尾状核内推注并留置20min，以免血液自针道返流。A、B组则以50μL生理盐水注入。骨蜡封闭钻孔,缝合切口。将金纳多(200mg/kg)研磨成粉，用50g/L羧甲基纤维素钠溶解并混匀，术后48h予B、D组灌胃(10mL/kg)，A、C组用等量50g/L羧甲基纤维素钠溶液灌胃。各组均每日1次，持续3周。1.4标本收集与检测生化指标检测：3周后脱臼法处死大鼠，断头取脑，滤纸擦干脑表面的液体，分析天平称重，按1∶9加入生理盐水匀浆，40

5、00r/min离心10min，取上清液，制成10%脑组织匀浆。用硫代巴比妥酸显色法测定MDA含量，再将10%脑组织匀浆稀释至1%，采用黄嘌呤氧化法检测SOD活力。按试剂盒操作程序进行测定。免疫组化检测：大鼠于出血3周后，100g/L水合氯醛腹腔麻醉，开胸暴露心脏，于心尖部剪一2mm左右小口，将穿刺针自此切口插入心脏并送达主动脉口处固定，37℃生理盐水200mL灌洗，继之以40g/L多聚甲醛溶液灌注内固定后断头取脑，置40g/L多聚甲醛溶液中后固定约8h，取尾状核部血肿周围脑组织，常规石蜡包埋，切片，进行免疫组化染色观察。HO1免疫组化阳性

6、细胞显色为胶质细胞胞浆棕黄色。计数方法：每张切片取5个高倍镜视野，计数5个高倍视野内的阳性细胞总数，计算每高倍视野下阳性细胞均数。1.5统计学处理应用SPSS10.0统计软件进行数据处理。实验数据用±s表示，对结果进行方差齐性检验，多组均数间比较采用单因素方差分析，多个样本均数间的两两比较用LSD法。取α=0.05为显著性检验水准。2结果2.1生化指标脑组织SOD活性变化：A、B组明显高于C、D组(P0.01)；A、B组间无明显差异(P0.05)；D组较C组明显升高(P0.01)。脑组织MDA含量变化：A、B组明显低于C、D组(P0.01)

7、；A、B组间无明显差异(P0.05)；D组较C组明显降低(P0.01，表1)。表1各实验组脑组织SOD活性、MDA含量的变化（略）Table1SODandMDAcontentsinthe4groupsGroupA:NS+solvent;GroupB:NS+ginkgo+solvent;GroupC:hemoglobin+solvent;GroupD:hemoglobin+ginkgo+solvent;*P0.01vs.groupsC,D;△P0.01vs.groupD2.2HO1染色阳性细胞数的变化每高倍镜下HO1阳性细胞数：A组(30

8、.90±3.67)、B组(30.50±4.19)显著低于C组(51.30±7.94)﹑D组(38.10±4.89)(P0.01)；A、B两组差异无统计学意义(P0.05)；C组显