三株昆虫共生菌的活性代谢产物研究

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1、万方数据万方数据DissertationSubmittedtoZhejiangNormalUniversityforMasterD叮VESTIGATIoNoNBIoACTIVET垣ET久BoLITESPRoDUCEDBYTHREElNSECTSYⅧIoNTSCandidate：ShuaiLiSupervisor：Prof．DonghuaJiangandAssociateProf．YinglaoZhangDiscipline：BotanyCollegeofChemistry&LifeScienceZhejiangN

2、ormalUniversity,Jinhua321004，Zhejiang万方数据本研究得封国家自然科学基金项目(21002092)和浙江省自然科学基金项目(Y2100757)资助TheresearchwassupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(21002092)andtheNaturalScienceFoundationofZhejiangProvince(Y2100757)万方数据三株昆虫共生菌的活性代谢产物研究摘要昆虫共生菌长期与昆虫保持

3、共生关系，是一类具有特殊生态作用的微生物。昆虫物种的多样性和栖息环境的复杂性决定了昆虫共生菌物种的丰富性和代谢途径的独特性。该类特境微生物尚未得到充分开发和利用，是微生物新物种和新活性天然产物的重要来源。本文分离得到l株螽斯肠道真菌和2株白蚁共生放线菌，通过形态学观察和基因序列分析对这3株共生菌进行了鉴定；利用硅胶、葡聚糖凝胶LH．20、Cls反相材料、HPLC等色谱分离技术对上述共生菌代谢产物进行分离，共得到10个化合物。利用ESI．MS，lHNMR，13CNMR，HMQC，COSY，HMBC等技术对分离得到的

4、化合物进行结构鉴定，其中1个是新化合物。此外，我们还对化合物的生物活性进行了研究。现分述如下：l，从螽斯肠道中筛选得到l株共生真菌ZS07，经形态学观察和ITS基因序列比对鉴定该肠道共生菌为Fusariumproliferatum。从该真菌发酵液中分离得到1个新化合物cercophorinsE(2)和5个已知化合物cercophorinsD(1)，rhodolamprometrin(3)，radicinin(4)，dehydroallogibbericacid(5)和3-methyl一6，8-dihydroxyi

5、socoumarin(6)。CercophodnsE和radicinin具有较好的除草活性，．在浓度为100舭时能明显抑制入侵杂草反枝苋(AmaranthusretroflexusL．)根的生长，抑制率分别为83．00／d铂65．2％。抑菌实验表明cercophorinsD，E及rhodolamprometrin对革兰氏阳性菌Bacillussubtilis(ATCC6633)具有较好的抑制活性，最低抑菌浓度MIC值为3．1．12．5pg／mL。2，利用稀释涂布平板法从白蚁中分离得到l株共生放线菌，经鉴定为Str

6、eptomycescanus。对该菌代谢产物进行柱色谱分离得到2个抗生素类物质resistomycin(7)和tetracenomycin(8)。Resistomycin具有较好的抗植物致病菌活性，其抑制稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)和苹果树腐烂病菌(Valsamali)菌丝生长的ICs0值分别为3．8pg／mL和1．1pg／mL，与阳性药放线菌酮效果相当(2．3万方数据摘要pg／mL，0．3pg／mL)；resistomycin能较强抑制稻瘟病菌孢子萌发，其对稻瘟病菌孢子萌发的IC50值为5．5

7、5I．tg／mL；采用盆栽实验法测定Tresistomycin对水稻稻瘟病菌的保护和治疗效果，结果表明，resistomycin对水稻稻瘟病具有较好的保护作用(防治率66．8％)，优于阳性对照药多菌灵(防治率58．7％)。Resistomycin抑制植物致病真菌活性属于首次报道。3，从白蚁蚁后体表分离得到l株共生放线菌，经鉴定为&davawensis。对该茵固体发酵产物进行分离得到两个色素类物质roseoflavin(9)和8-methylamino．8-demethyl．D．riboflavin(10)。Ros

8、eoflavin具有较好的抑制革兰氏阳性菌生长作用，其对最subtilis和Staphylococcusaureus(ATCC6538)的MIC值分别为1．56pg／mL和3．125I．tg／mL，与阳性药硫酸庆大霉素效果相当(1．56pg／mL，1．56p．g／mL)。上述研究提示，作为一类研究较少的特境微生物，昆虫共生菌有可能是新颖活性天然产物的重要来源，有关该类微生