olp白念菌丝特异基因hsgs双相表达差异及菌丝培养和rna提取方法的探讨

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1、Q坠里鱼盒菌丝鳖显基因基S堡墨区担塞达差显丞菌丝揸苤狸型△握亟虚法鲍拯过⑧论文作者签名：丛垃．指导教师签名：乏膨竺：论文评阅人1：王室捡数援亟昱直京匡型态堂．-评阅人2：医谦明数援蝗昱四刖太堂评阅人3：处正数援墟昱苴壑医型太堂答辩委员会主席：胡渣塞教授浙江太堂医堂院隘届日膣医院委员1：鲑良至教援杭州匝范太堂附属筮三医院委员2：挞旭瑗副教授浙江太堂痘厘生物堂丕委员3：昌虫法主任医崾逝江太堂匡堂院附届筮三医院委员4：樊童洁主任医!!亟浙江太堂医堂院附属目腔医院浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所

2、呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝鋈盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：／铷一靓签字日期："小年朔￡。日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿态茔有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权迸姿盘堂可以将学位论文的全

3、部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：傻地签字日期：yfj年r月rJFt导师签名：彳∥∥签字日期：∥’’年1月7√日浙江大学硕士学位论文致谢致谢三年的研究生生涯转瞬已接近尾声，期间有过挫折颓废，有过愤青伤心，也努力过、乐观过、欢笑过。曾经迫切希望自己能早点毕业，而今即将离去，心中又无限留恋和不舍。借此机会，我想对我的老师、家人、朋友表达我无限的感激之情。首先感谢我的导师何虹。在研究生学

4、习的三年中，何老师您不但提高了我的临床各项诊疗水平，而且打造了我的科研素质与能力，也引导着我德艺双馨、精益求精的人生追求，让我受用一生。如果不是您在这三年期间临床上的悉心指导和尽心安排，我不能掌握较全面的临床技能与知识，并胸有成竹地接待每一位患者，而且顺利受聘较好的工作岗位。如果不是您在这三年期间科研上的细心督促和全心帮助，我无法交出这份完整的毕业论文。如果不是你的严格教育和密切督导，我无法站在这里勇敢地面对各位评审老师。所以十分的感谢您!同样十分的感谢赵丹萍老师。尽管在实验最初的开端有诸多的不顺

5、利，您依然给了我一定的支持和指教，我表示内心的感谢!感谢吴葆萱老师，尽管我总是抱怨周末起得太早、休息时间减少，但在您身边受到的熏陶，是我重要的补充。作为医者和学者，我希望自己：青出于蓝而胜于蓝。感谢您!我很幸运，能作为你们的学生，深深的感谢!感谢口腔内科陈莉丽主任和所有的老师和医护人员。谢谢你们的帮助，谢谢!感谢浙江大学肿瘤研究所的彭佳萍、方永明和董琦等老师，感谢临床微生物检验中心的张荣和周宏伟老师，以及肿瘤研究所一起实验的同学们，感谢你们在实验技术等方面给予的无私帮助，感谢实验室那一帮子一起实验

6、、一起玩笑、一起恣意的，学长学姐学弟学妹，感谢你们!最后，我要感谢我的家人，在这些年中，无论我在外面遇到什么，无论我做了什么样的选择，家人是我最温暖的港湾，也是我前进的最大动力。感谢爸、妈对我无私的付出。尽管我对你们任性，尽管有时我的选择让你们失望，尽管我们表达感情的方式时有迂回，但是因为有你们的无限支持，让我飘荡的心极为踏实。我爱你们!浙江大学硕士学位论文致谢最朴实的语言代表我最诚挚的敬意，谢谢!在今后的日子里，我会认真学习，努力工作，不会辜负你们对我的付出!范艳于浙江大学华家池校区二零一三年四

7、月11浙江大学硕士学位论文中文摘要OLP白念菌丝特异基NHSGs双相表达差异及菌丝培养和RNA提取方法的探讨浙江大学医学院：口腔临床医学研究生：范艳导师：何虹中文摘要目的：探索口腔扁平苔藓中白念珠菌菌相转换的机制和意义，研究调控菌丝形成的关键因素。包括探讨白念菌丝形成与培养所用血清的不同灭活程度的关系，分析不同菌相白念RNA提取的适宜破壁方法。方法：自100例含41例糜烂型和59例非糜烂型的口腔扁平苔藓病人中分离白念珠菌，将之与标准实验株一同进行RPMI1640加不同程度灭活的小牛血清培养基进行其

8、菌丝相细胞培养，计算菌丝形成率；采用改良热酸酚法及酸洗玻璃珠法对念珠菌菌丝相及酵母相细胞破壁提取总RNA；对RNA定性定量及完整度检测；通过RT-PCR及Real．TimePCR对提取的RNA对4个菌丝特异基因HGCl、ECEl、HWPl、ALS3及1个信号调控分子EFGl基因在菌丝相及酵母相中的基因表达差异进行检测。结果：(1)念珠菌和白念珠菌的检出情况：59例非糜烂型扁平苔藓中分离得白念珠菌5例，热带念珠菌1例；41例非糜烂型扁平苔藓中分离得白念珠菌6例，克柔念珠菌1例，近平滑