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时间:2019-03-02
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1、2014届理学硕士研究生学位论文BMP信号途径在斑马鱼泄殖腔发育中的功能研究发育生物学硕士研究生:谢贝指导教师:阮华本研究受国家自然科学基金委员会面上项目(斑马鱼前肾管突变体的遗传筛选及机制研究,编号:31371466)资助。西南大学生命科学学院二零一四年四月中国·重庆MasterThesisFunctionalstudyofBMPsignalingpathwayinthedevelopmentofzebralishcloaca一一J●一-lMajor:DevelopmentalBiologyAuthor:XieBeiSupervisor:
2、RuanHuaThisworkwassupportedbyNationalNaturalScienceFoundationofChina(No.31371466):Geneticscr‘eenandmechanismstudyofzebrafishpronephricductmutants.SchoolofLifeScience,SouthwestUniversityChongqing‘ChinaMar10,2014独创性声明本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果,文中已加了
3、特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。学位论文作者:卸叹签字日期:z011}年箩月弓。日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院(筹)可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书,本论文:口不保密,口保密期限至年月止)。学位论文作者签名:谛叹签字日
4、期:洳1中年箩月≯日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IAbstract....................................................................................................................III第一部分文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11.1常见与泄殖腔相关的人类疾病⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..11.2小鼠泄殖腔的发育过程及相关信号通路⋯
5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11.3斑马鱼作为模式生物研究泄殖腔发育的优势⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21.4斑马鱼泄殖腔发育的基本过程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21.5斑马鱼泄殖腔发育过程中的相关信号通路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31.5.1BMP信号通路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31.5。2其他信号通路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31.6导致斑马鱼泄殖腔缺陷的其他因素⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41.7Hsp70热激活蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41.8本项目的立项依据、目的和
6、意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5第二部分材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72.1实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.72.2仪器、试剂和耗材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..72.3试剂配方⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.82.3.1LB培养基⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一82.3.2原位杂交相关溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82.3.3其他溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.112.4质粒和菌
7、株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122.5E.coil(大肠杆菌)化学感受态细胞的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.122.6TaqDNApolymerase的制备与提纯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..122.7斑马鱼totalRNA的提取和cDNA的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132.7.1斑马鱼totalRNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l32.7.2斑马鱼cDNA的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一132.8目的基因的扩增,重组和转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142.8.1目的基因的扩增⋯
8、聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)⋯⋯.142.8.2PCR产物的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一142.8.3目的基因的重组⋯⋯
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