慢性低氧高二氧化碳对小鼠骨骼肌线粒体功能的影响

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1、温州医学院硕士学位论文慢性低氧高二氧化碳对小鼠骨骼肌线粒体功能的影响姓名：郑续申请学位级别：硕士专业：神经病学指导教师：王小同2012-05-23温州医学院硕士学位论文慢性低氧高二氧化碳对小鼠骨骼肌线粒体功能的影响摘要目的现在有越来越多的研究发现呼吸系统慢性疾病，如慢性阻塞性肺疾病、肺心病等患者都存在着不同程度的外周骨骼肌功能障碍。我们通过建立慢性低氧高二氧化碳小鼠模型，观测该条件下小鼠骨骼肌线粒体功能的改变，并探讨其可能的机制。方法SPF级雄性共32只小鼠随机分成2组：正常常氧组(N0)；低0。高C0。实验组(EX)。其中16只小鼠用于做电镜观察、腺

2、苷酸含量的测定及细胞色素C表达量的测定，剩余16只用于做COXIV及线粒体膜电位的测定。低0：高C0：实验组置于低0：高C0：舱中(吸入气0。浓度为9％～1l％，C0。浓度为5．0％～6．0％，每天84,时，每周6天，持续4周，正常组小鼠吸入空气，其它条件与模型组相同。小鼠造模前和造模后分别称重；采用电镜观察骨骼肌线粒体形态；用紫外分光光度计法检测线粒体膜复合物IV的活性变化；用荧光分光光度计法检测膜电位变化水平；用高效液相法测定骨骼肌腺苷酸ATP、ADP、AMP的含量；用实时定量PCR法测定胞浆中细胞色素C的含量。结果(1)EX组小鼠造模4周后体重增

3、量明显较N0组低，差异有统计学意义(仄0．05)。(2)电镜下观察发现EX组小鼠骨骼肌肌原纤维走行紊乱，出现Z线漂移，肌纤维萎缩变细，线粒体肿胀，膜部分消失，嵴不规则断裂；N0组小鼠骨骼肌肌节及线粒体超微结构正常。(3)EX组小鼠骨骼肌线粒体膜复合物工V活性较N0组小鼠增高，差异具有统计学意义(仄O．05)。(4)EX组小鼠骨骼肌线粒体膜电位较N0组小鼠减低，差异有统计学意义(仄O．05)。(5)EX组小鼠骨骼肌腺苷酸ATP的含量较N0组小鼠减低，ADP和AMP的含量较N0组小鼠增高，差异均具有统计学意义(仄0．05)。温州医学院硕士学位论文(6)EX

4、组小鼠胞浆内细胞色素CmRNA的表达量较N0组小鼠增高，差异具有统计学意义(p

5、骼肌；小鼠；线粒体；三磷酸腺苷；膜电位；线粒体膜复合物：细胞色l素C温州医学院硕士学位论文EfkctofMitochondrialFunctionintheSkeletalMuscleoftheMiceexposedtoChronicHypoxia．Hvpercapnia．一-一●，^^AbstractObjective：loinvestigatetheeffectofmitochondrialfunctionintheskeletalmuscleofthemiceexposedtochronicHypoxia—Hypercapniaandtoexpl

6、oreit’Smechanism．Methods：Thirty—twoadultmalemicewererandomlydividedintocontrolfN01andexperiment(EX)groups．nemiceofEXgroupwereexposedtoanatmospherecontaining9％．11％02with5％一6％C02for8hoursadayduring4weeks．Themicewereweighedandthechangesofthemicrostructureinthemitochondriaoftheskele

7、talmusclewereobservedbythetransmissionelectronmicroscopethe．TheactivityoftheCOXIandCOXIllweremeasuredbyultravioletspecrophotometer．ThemembranepotentialofthemitochondriawasmeasuredusingfluorospectrophotometerwhiletheconcentrationsofATP,ADPandAMPweremeasuredbvHPLCandtheexpressiono

8、fCyt．CmRNAwasassayedbyreal．timePCR．Results：Comp