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1、专题七生物技术实践(时间:40分钟 满分:90分) 测控导航表考点题号及难易度1.传统发酵技术1,6(中)2.微生物培养技术2,43.植物组织培养技术3(中),74.生物技术在其他方面的应用5,8非选择题(包括8小题,共90分)1.(2013东北三省四市第二次联考)下图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图,请分析并回答:(1)过程甲中使用的微生物是 。在鲜苹果汁装入发酵瓶时,要留有大约 的空间。经过10~12d后,在酸性条件下用重铬酸钾检测样液,如果颜色变为 色,说
2、明产生了酒精。 (2)过程乙中使用的微生物是 ,可以从食醋中分离纯化获得,步骤如下: 第一步:配制 (填“固体”或“液体”)培养基; 第二步:对培养基进行高压蒸汽灭菌;第三步:接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和 ; 第四步:培养。温度控制在 ℃范围内; 第五步:挑选符合要求的 。 (3)在 的条件下,如果缺少糖源,乙中的微生物将甲过程的产物变为 ,再将其变为醋酸。 解析:(1)果酒的制作利用的是酵母菌,酵母菌发酵初期需要氧气,同时为防止果酒发酵过程中液体溢出,需在发酵瓶中留有约1/3
3、的空间。(2)果醋的制作需要醋酸菌;分离纯化醋酸菌需在固体培养基中,采用稀释涂布平板法或平板划线法接种,培养基要用高压蒸汽灭菌,醋酸菌适宜的生长温度为30~35℃,其是严格的好氧菌,在缺少糖源的条件下,醋酸菌将酒精氧化为乙醛,再氧化为醋酸。答案:(1)酵母菌 1/3 灰绿(2)醋酸菌 固体 平板划线法 30~35 菌落(3)氧气充足(有氧) 乙醛2.(2013山东济南模拟)低温蛋白酶是海洋嗜冷菌分泌的酶类,最适温度在20℃左右,作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。如图为分离可分泌低温蛋白酶的某种嗜冷菌的操作步骤,据图回
4、答问题:(1)分装前,对培养基要进行 操作;分装后,为避免杂菌污染,要及时进行 操作。 (2)将扩大培养后的深海微生物用 法接种到含酪蛋白的固体培养基表面,在适宜条件下培养一段时间,挑出形成透明圈的单一菌落,即为初选出的嗜冷菌。从嗜冷菌分泌的蛋白质中分离出低温蛋白酶的最常用的方法是 。 (3)为进一步检测分离出的嗜冷菌最适温度,将该菌按上图所示分5组分别置于 中进行培养, 一组所对应的温度为最适温度。 解析:(1)制备培养基过程中,溶化后分装前,需对培养基进行调pH操作;为避免杂菌
5、污染,要及时进行高压蒸汽灭菌操作。(2)为使微生物分离,常用的接种方法是稀释涂布平板法或平板划线法;从嗜冷菌分泌的蛋白质中分离出低温蛋白酶最常用的方法是电泳法。(3)为进一步检测分离出的嗜冷菌的最适温度,将该菌按图中所示分5组分别置于恒温箱中进行培养,透明圈与菌落直径比值最大的组就是处于最适温度的那一组,此温度就是该菌的最适温度。答案:(1)调pH 高压蒸汽灭菌(2)稀释涂布平板(或平板划线) 电泳法(3)恒温箱 透明圈与菌落直径比值最大3.(2013宁夏银川第二次模拟)研究发现紫草素和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取
6、及应用如图所示。请回答:(1)配制诱导形成愈伤组织的固体培养基,分装后要进行 ;接种前,要对紫草茎切块进行消毒处理,用于消毒处理的药剂和时间都应根据所选材料分别对待,原因是 。 (2)用于离体培养的茎切块,接种培养3~4d后发现少数培养基被污染,若是在材料附近的培养基中出现白、黑或绿等不同颜色、疏松、呈绒毛状菌落,则可判断属于 (填“细菌”或“真菌”)污染,此时 (填“能”或“不能”)打开培养瓶,如何继续操作? 。 (3)紫草素提取宜选用 法,操作时宜采用 加热。 (4)筛选乳酸菌A时可
7、选用 或 接种。 (5)可用金黄色葡萄球菌来分别检验紫草素和乳酸菌素抑菌特性,抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定 来比较紫草素和乳酸菌素的抑菌效果。 解析:(1)配制诱导形成愈伤组织的固体培养基,分装后要进行高压蒸汽灭菌;接种前,要对紫草茎切块进行消毒处理,用于消毒处理的药剂和时间,都应根据所选材料分别对待,原因是既要考虑消毒效果又要考虑材料的耐受能力(或保持外植体的活性)。(2)培养基中出现白、黑或绿等不同颜色、疏松、呈绒毛状菌落,属于真菌污染,此时不能打开培养瓶,若打开培
8、养瓶将导致真菌扩散,正确的做法是将被污染的培养瓶用高压蒸汽灭菌后再清洗处理。(3)紫草素易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂,从培养物干粉中提取紫草素宜选用萃取法,操作时宜采用水浴加热,既能提高萃取效率,又可以避免引起爆炸。(
