mir-126抑制结肠癌侵袭转移的功能及其机制研究

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1、分类号B235:3UDC610硕士学位论文学校代码密级10533miR-126抑制结肠癌侵袭转移的功能及其机制研究ThestudyofmiR-126invasionandmetastasissuppressionfunctionanditsmechanismofcolonCanCer作者姓名:学科专业:研究方向:学院(系、所):指导教师:郭叶青临床医学消化内科湘雅三医院消化科王晓艳教授中南大学2013年5月原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经

2、发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在在论文中作了明确的说明。作者签名:社嘲等也等日关于学位论文使用授权说明本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文;学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。期畴册学本课题受如下资金资助:国家

3、自然科学基金(NO.81272736)湖南省科技计划项目(NO.2011TT2020)中南大学湘雅三医院“125”人才工程(2011.2015)ⅡmiR-126抑制结肠癌侵袭转移的功能及其机制研究摘要:目的:研究miR-126在体内是否具有抑制结肠癌细胞增殖、侵袭转移的作用及miR-126对CXCR4及RhoA信号通路是否具有调控作用。方法:1.利用慢病毒载体构建稳定过表达miR-126的结肠癌细胞系HCTll6及稳定沉默miR-126的结肠癌细胞系SW480。2.利用稳定过表达miR-126的结肠癌细胞系HCTl16及稳定沉默miR-126的结肠癌细胞系SW

4、480进行裸鼠皮下、尾静脉成瘤实验。3.realtimePCR检测稳定过表达及沉默miR-126的结肠癌细胞系中CXCR4及RhoA信号通路重要分子的表达。4.利用原位杂交技术检测人结肠癌组织芯片癌及癌旁正常黏膜中miR-126的表达,免疫组化技术检测人结肠癌组织芯片癌及癌旁正常黏膜中CXCR4及RhoA信号通路重要分子的表达,分析各分子的表达与结肠癌临床病理特征之间的关系,并进行miR-126与CXCR4及RhoA通路重要分子表达的相关性分析及生存分析。结果:1.miR.126在HCTll6过表达实验组中的表达较对照组上调5.08倍(P

5、80沉默实验组中的表达为其对照组的O.128倍(P

6、realtimePCR结果表明在稳定过表达miR.126结肠癌细胞系HCTll6实验组中CXCR4、RhoGEF的表达较其对照组明显下调,舢mGAP5的表达较其对照组明显上调(P

7、通路重要分子RhoA、RhoGEF、RhoGAP、ROCK、P13K、PAKl、PKNl在人结肠癌组织中的表达较癌旁正常黏膜组织均明显上调(PO.05)。相关分析结果显示miR.126的表达与CXCR4、RhoA、RhoGEF、ROCK的表达明显负相关(PO.05);CXCR4的表达

8、与RhoA、RhoGEF、ROCK的表

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