胶质母细胞瘤干细胞与肿瘤血管生成的相关性研究

胶质母细胞瘤干细胞与肿瘤血管生成的相关性研究

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1、安徽医科大学ANHUIMEDICALUNIVERSITY硕士学位论文论文题目胶质母细胞瘤干细胞与肿瘤血管生成的相关性研究Correlativeresearchbetweenglioblastomastem-likecellsandtumorvascularization作者姓名贺虎指导教师牛朝诗教授学科专业外科学(神外)研究方向脑肿瘤基础与临床论文工作时间2010年5月至2012年5月学位论文独创性声明本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对

2、本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名:日期:年月日学位论文使用授权说明本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版,有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名:导师签名:日期:年月日日期:年月日目录英文缩略词表…………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………

3、…2英文摘要………………………………………………………………4前言……………………………………………………………………6第一章胶质母细胞瘤干细胞分离、培养、纯化与鉴定1引言……………………………………………………………82材料与方法……………………………………………………83结果……………………………………………………………134讨论……………………………………………………………185结论……………………………………………………………22第二章胶质母细胞瘤干细胞能够向内皮细胞分化以促进肿瘤血管生成1引言……………………………………………………………232材料与方法……………………

4、………………………………233结果……………………………………………………………264讨论……………………………………………………………315结论……………………………………………………………32全文总结及下一步研究方向…………………………………………34参考文献………………………………………………………………35附录……………………………………………………………………39致谢……………………………………………………………………41综述……………………………………………………………………42安徽医科大学硕士学位论文英文缩略词表英文缩写英文全称中文名称bFGFBasicfibrob

5、lastgrowthfactor碱性成纤维生长因子BMBasicmedium基础培养基BTSCsBraintumorstemcells脑肿瘤干细胞BTSBraintumorsphere脑肿瘤干细胞球DAPIDiamidine-phenyl-indolel二脒基苯基吲哚DMEM/F12Dulbeco'smodifiedEagle'smedium/F12改良的Eagle/F12培养基EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸EGFEpidermalgrowthfactor表皮生长因子FBSFetalbovineserum胎牛血清FITCFluor

6、esceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素GBMGlioblastoma胶质母细胞瘤GFAPGlialfibrillaryacidicprotein胶质纤维酸性蛋白GSCsGlioblastomastemcells胶质母细胞瘤干细胞NSCsNeuralstemcells神经干细胞NSENeuronespecificenolase神经元特异性烯醇酶PBSPhosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲液SFMSerum-freemedium无血清培养基SCMSerum-containingmedium含血清培养基VEGFVascularEpidermalgr

7、owthfactor血管内皮生长因子1安徽医科大学硕士学位论文胶质母细胞瘤干细胞与肿瘤血管生成的相关性研究中文摘要目的(1)从胶质母细胞瘤组织中分离、培养肿瘤干细胞,并进行纯化和鉴定从而获得可靠的BTSCs株;(2)检测CD133、Nestin、CD31和VEGF在胶质母细胞瘤干细胞和肿瘤微血管系统中的表达,探讨胶质母细胞瘤干细胞在肿瘤血管的生成中所起的作用。方法(1)利用简化的无血清培养基(SFM)和悬浮培养方法,从15例GBM中分离培养BTSCs,采用有限稀释法克隆筛选以纯化

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