杉木遗传多样性的issr研究

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1、TheStudyonthegeneticdiversityofCunninghamiaLanceolataByISSRbyHaoBoboAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScience1nGeneticslnCentralSouthUniversityofForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangshaHunan410004，P．R．CHINASupervisor

2、ProfessorXUGangbiaoMay,2014燃煳中南林业科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品，也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：泰}碉拥阳f髟年歹月力影日中南林业科技大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，

3、同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于：1、保密口，在年解密后适用本授权书。2、不保密口。(请您在以上相应方框打“√’’)作者签名：赤阍捌力f￥年』月肜日翩嚣够加中气岁月矽日摘要杉木(Cunninghamialanceolata(Lamb．)HooK)属杉科(Taxodiaceae)杉木属的高大乔木，为第四纪冰期的孑遗植物，是我国南方最主要的造林树种之一，分布于我国南方

4、16个省区，其中，黔东南、湘西南、桂北、粤北、赣南、闽北和浙南等地区是我国杉木的重点产区。本研究拟采用ISSR(inter-simplesequencerepeats)分子标记，对杉木全分布区的种源进行遗传多样性分析，以期从分子水平上全面揭示杉木种源遗传变异分布格局，探讨杉木种源间的亲缘关系，为杉木遗传资源管理及高世代遗传改良提供分子依据。主要研究结果如下：(1)采用正交设计，建立了稳定的、可重复的ISSR．PCR扩增反应体系：201aL反应体系为：M92+1．5mmol·L～，dNTP0．3mmol·L～，引物0．7lxmol·L～，DNA70ng，Taq酶

5、1U。扩增程序为：94℃预变性5min；94℃变性40S，退火40s(退火温度随引物的变化而不同)，72℃延伸2min，38个循环；72℃延伸7min；4oC保存。(2)利用最佳ISSR．PCR反应体系，从100条引物中筛选出稳定的、重复性高的9条引物对40个种源进行ISSR．PCR扩增，9条ISSR引物共检测出133条带，其中122条多态性条带，多态条带百分率(PPB)为91．73％，各种源PPB和Shannon表型多样性指数(Hpop)分别为37．46％～55．75％和0．2015～0．3445，这表明杉木种源具有较高的遗传多样性，种源间遗传分化较大。其中

6、，湖南会同、安徽泾县、广西融水、贵州黎平种源遗传多样性最高，江苏句容、河南新县、云南马关、富源种源遗传多样性最低。分子方差分析(AMOVA)揭示，种源间和种源内遗传变异分别占总变异的46．51％和53．49％，种源间遗传分化极显著(西sT=0．4651，P

7、键词：杉木；种源；ISSR标记；遗传多样性ABSTRACTCunninghamiaLanceolata，akindofarborsinTaxodiaceaeandapreciousplantofquatemaryiceage，isoneofthemainspeciesforafforestationinsouthernChina·DistributedinsixteenprovincesandregionsinsouthChina,distributionareaofC·lanceolataspanstenlatitudesfromnorthtosouthan

8、d15longitudesfromea