斑马鱼神经胶质瘤模型的建立及其相关分子机制的研究

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时间:2019-02-27

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1、中山大学硕士学位论文斑马鱼神经胶质瘤模型的建立及其相关分子机制的研究姓名:李冬申请学位级别:硕士专业:发育生物学指导教师:彭英20100607⑥!.生杰曼斑马鱼神经胶质瘤模型的建立及其相关分子机制的研究硕士学位论文斑马鱼神经胶质瘤模型的建立及其相关分子机制的研究专业:发育生物学硕士生:李冬导师:彭英教授摘要研究背景:神经胶质瘤是一种发源于神经外胚层的常见颅内肿瘤,临床上以浸润性生长和广泛侵袭性为主要特点并伴有转移现象的发生,已成为危害人类生命健康的主要肿瘤之一。尽管诊断和治疗水平的提高使得神经胶质瘤的局控率有明显改善,但是目前临床上仍无法找到克服胶质瘤广泛侵袭和转移的好办

2、法。在基础实验中,以往主要是在体外去研究胶质瘤发病的分子机理,相关的体内分子机制研究主要是使用传统的啮齿动物——大小鼠模型。此类模型周期长,效率低,也很难动态监测肿瘤的体内发展情况。这些缺点极大的制约了胶质瘤体内分子作用机制的研究。因此,建立新的胶质瘤模型,全面地解析神经胶质瘤浸润性生长和转移的分子机制,深入探索神经胶质瘤转移的相关标志物,是有效控制神经胶质瘤进’‘步恶化,提高患者生存率的关键。斑马鱼作为脊椎动物模式生物具备了自己很多独特的优点:它易于饲养,经济方便,产卵量高,斑马俪.体外受精,胚胎透明,易于实验观察,其基因组与人来有着高度的同源性,分子遗传学操作简便易行

3、。在自然界巾,斑马鱼也会自发产生各利t组织器官的癌变,并且与人类的肿瘤在器官和组织水平上都有着很大的相似性,其致癌基冈也与人类的癌症相关基冈有着很大的保守性。斑马负肿瘤模型在抗肿瘤药物筛选及其分子靶标研究中更是具备了高效性和动态观察的优势,并逐渐成为国际上肿瘤体内研究q-的热门工具。研究口的:我们借助斑马鱼胚胎建立胶质瘤模型可以解决神经胶质瘤体内分子作用机制研究中周期长和效率低的难点,并可以高效的进行抗肿瘤药物的筛选。利用此种模式生物,我们可以研究神经胶质瘤体内治疗中新的分子作用靶标Il囝!。之妻浸斑马鱼神经胶质瘤模型的建立及其相关分子机制的研究硕士学位论文及其信号通路中

4、靶标分子的作用机制,为神经胶质瘤的治疗寻找新的突破。研究方法:首先使用细胞生物学方法建立荧光标记的胶质瘤细胞系,接着使用显微注射法将胶质瘤细胞移植入斑马鱼体内,最后使用原位杂交、荧光定量RT-PCR、血管内源性碱性磷酸酶染色及荧光显微镜直接观察转基因鱼等方法检测胶质瘤细胞和斑马鱼的相关变化情况。研究结果:我们成功的建立了斑马鱼神经胶质瘤模型,并发现人胶质瘤细胞可以在斑马鱼胚胎体内存活、增值、迁移并诱导血管增生等现象。最后我们在分子生物学层面上进一步研究了人胶质瘤细胞诱导斑马鱼肠下血管增牛的分子机制。研究结论:斑马鱼是一种新的研究肿瘤体内发展情况的模式生物并具有着自己很多独

5、特的优点。人胶质瘤细胞在斑马鱼体内与整个系统发生互作,可以在其体内增值,扩散,并通过诱导分泌斑马鱼血管内皮牛在因子(VEGF)而促进斑马鱼肠下血管增生。关键词:神经胶质瘤;斑马鱼模型;分子机制IIl⑨,:.点怂斑马鱼神经胶质瘤模型的建立及其相关分子机制的研究硕士学位论文TheestablishmentofzebrafishgliomamodelandtheresearchonitsrelatedmolecularmechanismMajor:DevelopmentBiologyMasterCandidate:DongLiSupervisor:YingPengAbstrac

6、tBackground:Gliomathatderivedfromneuralectodermisoneofthemostcommontumorinbrainandhasthespecificclinicalcharacteristicsjustlikegreatinvasion,significantdisseminationandmetastasis.Asaresult,itmakesgreatdamagetohumanbeings’health.Althoughwehavemadegreatprogressindiagnosisandtreatmenttoimpro

7、vethetherapeuticeffects,theproblemsofgreatinvasionandmetastasisseemunsettled.Mostofthefundamentalresearchesonmolecularmechanismsarerestrictedinvitroandtheinvivoresearcheshavealwaysbeendoneintherodentmode——一ratormousecancermodel.Thiskindofmodelhavemanydisadvantagessu

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