云南高黎贡山猪微卫星dna多态性分析

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1、2010年第1期浙江畜牧兽医(<<<试验;{研究灸云南高黎贡山猪微卫星DNA多态性分析>>>>董新星,杨婷,屈再久,沈雪鹰,尹玉安,连林生(1.云南农业大学动物科技学院,云南昆明650201;2.云南腾冲县畜牧局)摘要:高黎贡山猪是云南省独特的小型猪种,其肌内脂肪的非饱和脂肪酸和营养必需脂肪酸的含量远高于其他猪种,具有发展优质保健猪肉的良好潜质。本研究选用世界粮农组织(FAO)和国际动物遗传学会(ISAG)联合推荐的2O个微卫星位点对高黎贡山猪和杂种群体进行遗传学检测和分析。结果表明:2O个微卫星座位在群体中均表现为多态,每位

2、点等位基因数2—5个。群体平均多态信息含量高黎贡山猪为0.6829,杂种群体为0.5924,平均杂合度分别为0.7302和0.6465。关键词:微卫星;遗传标记;遗传变异;高黎贡山猪中图分类号:$828.2文献标识码:A文章编号:1005—7307(2010)01—0001—004猪的品种改良一直是猪育种学的主要方向之一,均属优质肉范畴,肌内高非饱和脂肪酸和营养必需育种学家通过不同品种、品系猪之间的杂交育种,并脂肪酸含量是该品种的主要特征之一,尤其亚油酸、经严格的品种性状评定,选育出了猪的良好经济性亚麻油酸和花生油酸等营养必需

3、脂肪酸含量分别为状。然而,由于高生产性能猪的肉质性状不断退化,19.75%、16.24%和20.99%,远高于同一地区的其甚至丢失,且对生长环境要求越来越高。与此同时,他猪种,具有发展优质保健猪肉的良好潜质J。人们对肉质及其营养价值的要求日趋迫切,因而猪肉本文研究了高黎贡山猪和杂种群体20个微卫品质改良刻不容缓。我国是一个畜禽遗传资源十分星DNA座位的多态性,以期为今后高黎贡山猪的保丰富的国家,如何挖掘和利用中国地方猪种的肉质优种和开发利用提供有益的参考资料。良基因,为猪肉品质性状改良提供基因资源,用标记l材料与方法辅助选择和

4、辅助渗入等方法与常规育种相结合,选择1.1试验动物试验用24头高黎贡山猪样本采自和培育新型优质新品种(系)将成为研究热点。高黎贡山猪主产区云南省保山市腾冲县明光乡和瑞云南高黎贡山猪原名明光小耳猪.取其产区云滇乡4个自然村的养猪农户,公母各半。样品为高南省保山市腾冲县明光乡而得名⋯。多分布于高黎贡山猪肥育至5O一60kg后屠宰所取的肝组织,黎贡山两侧傈僳族聚居地。产区交通闭塞,农业生采用常规酚/氯仿抽提法进行基因组DNA提取,分产粗放,甚至还有刀耕火种的习惯。农业以水稻、玉装保存于一20℃待用。米、养麦、甘薯为主,海拔1800~

5、2000m,年平均气1.2试验方法采用世界粮农组织(FAO)和国际动温低于12℃,无霜期7~8个月,年降雨2000mm,多物遗传学会(ISAG)联合推荐的27对微卫星DNA引集中在5—1O月,相对湿度79%,气候凉爽、湿润,物中的20对引物(详见表1),其详细引物信息见网区内林木茂密,野生饲料资源丰富J。站http://www.~earkdh.org。本试验采用PCR反应高黎贡山猪外貌特征为耳小,体型小,被毛黑总体积为25,含2.510×Taqbuffer,1.5—2.5色,具有抗逆性强,肉质好等特性。该猪胴体瘦肉率MgC12

6、(25mMeach),KCI(12.5M)和DMSO因位为45.84%,肌内脂肪为7.76%,肉质性状多项指标点而异,2dNTPs(2.5mMeach),1PrimerF(5pmol/rd),1lPrimerR(5pmol/),0.4Taq收稿日期:2009-09.16酶(2.5U/),14.6—15.6lddH20,1模板基金项目:“滇撒猪配套系特色养猪产业化生产”农业科技成果DNA。PCR循环参数:95%预变性5rain;95℃变性转化资金项目(编号:2006CB200271)0.75~1rain;47~60℃退火0.75

7、—1min;72℃延伸作者简介:董新星(1984一),女,硕士研究生,主要从事动物遗0.75~1rain;72~C后延伸5—7min。根据座位不同延传育种研究。通讯作者:连林生(1937一),男,江西,教授.主要从事动物遗传伸20-30个循环,4~C保存。然后用8%聚丙烯酰胺育种研究。凝胶(30%丙烯酰胺20mL,10×TBE7.5mL,47mL2浙江畜牧兽医2010年第1期ddH2O,525过硫酸胺和37.5TEMED),恒压6O短(bp最大)的带设定为A,依次为B,C,D·⋯·,记V,据片段大小电泳1O一14h,分离产物,

8、银染显色。录基因型。如无扩增条带,则为无效等位基因'是由凝胶成像系统照相,并将图像输人BandScan4.3电泳于某些等位基因在引导座位上的替换、插入或其他原成相分析系统,根据分子量进行判型,把泳动距离最因所造成的无法扩增所致。表1微卫星信息1.3数据统计分析等位基因数、有效

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