转录因子foxa1在乳腺癌细胞增殖中的功能研究

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1、学校代号：学号：密级：10532S11222017湖南大学硕士学位论文转录因子FOXA1在乳腺癌细胞增殖中的功能研究学位申请人姓名：整雄态．导师姓名及职称：递捆至熬援培养单位：生物堂院专业名称：生物医堂王程论文提交日期：2Ql垒生主且2三日论文答辩日期：．．2Q!垒生鱼旦2日答辩委员会主席：割选明熬援RolesofFOXAltranscriptionfactorinbreastcancercellproliferationbyDENGXiongJieB．E．(CentralSouthUniversityofFores

2、tryandTechn0109y)2011AthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequrimentsforthedegreeofMasterofEngineeringBiomedicalEngineeringintheGraduateSchoolofHunanUniversitySuperieorProfessorTANYongJanMay，2014湖南大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注

3、引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。菖作者签名：勺讯红日期：Ⅵ'年衫月7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1．保

4、密口，在——年解密后适用本授权书。‘2．不保密口。(请在以上相应方框内打”√”)菖作者签名：导师签名：竹和．日期：ⅥlⅥ年日期：■LV年日G，4，，，月厂k＼。转录因子FOXAI在乳腺癌细胞增殖中的功能研究摘要肿瘤基因治疗是指将有治疗作用的目的基因通过一定的方式导入靶细胞，使其获得特定的功能，继而执行或介导对肿瘤细胞的杀伤和抑制作用，达到治疗肿瘤的目的：寻找治疗各类恶性肿瘤的靶基因近年来也成为研究热点。转录因子FOXAl隶属于FOX转录因子家族，已有研究发现FOXAl参与调控细胞的增殖和分化、器官发育、胚胎发生及肿瘤

5、的发生发展等生理病理过程。在肿瘤细胞中，FOXAl能介导细胞周期相关基因的表达，从而调控细胞周期的进展。本文在此基础上，主要研究FOXAl对乳腺癌细胞增殖影响，探究FOXAl调控细胞增殖的分子机制。本文以乳腺癌细胞株MCF．7和ZR．75．30为研究对象，用介导FOXAlshRNA的慢病毒感染FOXAl内源性高表达的乳腺癌细胞株MCF．7，特异性敲除FOXAl的表达：同时用高表达FOXAl的慢病毒感染FOXAl内源性低表达的乳腺癌细胞株ZR．75．30。通过WB和SqRT·PCR等实验方法检测FOXAl的表达水平，同

6、时考察细胞周期依赖性激酶抑制因子P21、P27的表达变化。结果发现FOXAl的表达与P2l、P27的表达呈正相关性，预示FOXAl可能对P21、P27的转录水平有调节作用，进而参与细胞周期调控。然后，我们考察了FOXAl对乳腺癌细胞增殖的影响，通过细胞生长曲线的绘制和流式检测细胞的周期，发现高表达FOXAl能有效抑制乳腺癌细胞株ZR．75．30的增殖，并使细胞明显被阻滞在G0／Gl期。通过CHIP实验，发现FOXAl能够与P21、P27的启动子区域结合。然后我们构建了包含有P2l、P27的．5000kb启动子区域的重

7、组质粒，将重组质粒与FOXAl表达质粒共转染进ZR．75．30细胞，通过测定荧光素酶实验考察P21和P27的转录活性的变化，发现FOXAl的高表达能有效提高P21和P27的转录水平。综合本文实验结果表明，在乳腺癌细胞株ZR．75—30中高表达FOXAl能有效抑制细胞的增殖，我们发现的分子机制是FOXAl的高表达能够有效提高P2l和P27的转录水平，导致细胞周期停滞，进而细胞增殖受到抑制。关键词：细胞增殖；转录因子FOXAl：转录活性：P2l；P27Ⅱ硕士学位论文AbstractTumorgenetherapyrefe

8、rstoleadingtargetgenewiththerapyfunctionintotargetcellstoacquirespecificfunctiontoexecuteormediatekillingorcontrollingeffectontumorcell，andthentoachievetherapeuticpurpose．Lo