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时间:2019-03-01
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1、宁夏大学硕士学位论文小麦株型调控基因TaAP2的分离、定位与功能分析姓名:韦沙申请学位级别:硕士专业:作物遗传育种指导教师:刘生祥;贾继增201204摘要IIMIIIMJJlJII删IJlUY2163057株型是影响作物产量的重要农艺性状,包括株商、分蘖数、分蘖角度等。研究株型调控基因对株型育种具有重要的学术价值和生产实践意义。通过对小麦Ⅸ灌转录因子家族基因T盔dP2的遗传定位、表达、亚细胞定位研究以及转化功能验证,耐盐鉴定。探讨了T枷3)2基因对小麦株型的调控功能。研究结果如下:1.分离了来自普通小麦A、B、D基因组的三个TaAP2同源基因:T鲥JP2-Aj、死4P2捌、叛4P2-Dk2
2、.利用农杆菌介导法,以水稻“日本晴”为受体,将TaAP2转化水稻。证实TaAP2是小麦ERF家族的一个新的多效基因。它能够调控植株的株高、分蘖数、分蘖角、叶角、生育期、育性等性状,同时对盐极其敏感。3.缺体.四体定位表明TaAP2-A1、TaAP2-D1位于小麦第二同源群。将TaAP2-A1定位于小麦2A染色体上标记Xwpt2882和Xwpt3114之间,遗传距离分别为8.5cM和2.7cM。4.实时荧光定量PCR结果表明TaAP2在小麦幼苗的根、茎、叶中均表达,在三个组织中的表达量为茎>叶>根。工亚细胞定位结果表明TaAP2位于细胞核内。6.多样性分析表明TaAP2的分化早于单、双子叶植
3、物的分化和植物种属问的分化。TaAP2无论在小麦A、B、D亚基因组内还是亚基因组之间都是一个非常保守的基因。关键词:小麦,株型,调控基因,TaAP2Croparchitectureisallimportantagronomictraitfor:grainproduction.WeproposedtonamethenovelERFtranscriptionfactorfamilygeneasTaAP2thatregulateplantarchitecture.Theprogressesweilgshowedasfollows:1.TheorthologousgeneTaAP2-A1,TaAP
4、2-B1,TaAP2-D1fromA,BandDgenomesofhexaploidwheat(Tri蛀cumaestivumL.)werecloned.2.TaAP2wasintroducedintoricevariety、Nipponbare(Oryzasativassp.Japonica)byusingAgrobacteriumturneraciens-mediatedTrasnformation.TheresulmshowedthatTaAP2isanovelpleiotropicgeneinERFtranscriptionfactorfamily.Itregulateplanth
5、eight,tillernumber,tillerangle,leafangle,growthperiod,fertilityandothertraits,simultaneouslyalsoissensitivetosalt·3.Aseriesof‘ChineseSpring’nulli—tetrasomicstocksworeemployedtoascertainthechromosomal10cationofTaAP2,theresultshowedthatTaAP2Wasonwheatchromosome2Aand2D.TaAP2wasfinelymappedbetweenmark
6、ersXwpt2882andXwpt3114onchromosome2Awiththegeneticdistanceof8.5cMand2.7cM,respectively.4.RealtimequantitativePCRshowsthatTaAP2expressionwasdifferentinroots,stemsandleaves,andtheexpressionofthemWasintheorderasstems>leaves>roots·5.WefusedthecodingsequenceofTaAP2withthatofGFPunderthecontrolofthe35Spr
7、omoter(35s:TaAP2:GFP)anddeliveredtheconstructintoonionepidermalcellsbyparticlebom-bardment.TheTaAP2proteinlocalizedtheGFPsignaltothenucleus.6.AnalysisofsequencediversityshowsthatTaAP2maybeveryconservativeincereal
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