银杏内酯b(ginkgolide b)抑制小鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应及细胞凋亡与nf-κb的关系

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1、本课题得到国家自然科学基金重点项目及江苏高校优势学科建设工程资助项目资助：国家自然科学基金重点项目，NaturalScienceFoundationofChina，No．30930035．江苏高校优势学科建设工程资助项目，AProjectFundedbythePriorityAcademicProgramDevelopmentofJiangsuHigher·EducationInstitutions(PAPD)苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的

2、内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：日期：≥型乙．．r．a6苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂

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4、脑缺血再灌注损伤后NF．r．B的激活以及炎症反应、细胞凋亡的影响方法：采用小鼠短暂性大脑中动脉阻塞(transientmiddlecerebralarteryocclusion，tMCAO)模型观察GB10、20、40mg／kg对脑梗死体积、脑水肿及行为学症状的影响，小鼠脑缺血再灌注后即时尾静脉注射给药。应用免疫荧光法分析NF．rd3的核转位及小胶质细胞的活化；采用RT-PCR技术检测TNF．a，IL．1p及iNOSmRNA的表达；采用Western．blot法检测小鼠大脑皮层11cBa，P．11《：Ba，P．IKKa，p53，Bcl．

5、2，Bax及Caspase3蛋白含量。结果：GB10、20、40mg依g静脉注射呈剂量依赖性减少tMCAO小鼠脑梗死体积，降低脑含水量和改善行为学症状(P<0．05，P<0．01)。Westem．blot显示：小鼠缺血再灌注3小时后大脑皮层缺血区Ird3a的含量显著降低(P

6、量p65蛋白表达于神经细胞胞核，说明缺血使NF．rd3从细胞浆移位至细胞核；GB20mg／kg能明显抑制NF．rd3的核转位。免疫荧光亦证明：假手术组小鼠大脑皮层小胶质细胞处于静息状态，缺血再灌注2天后，模型组小鼠大脑皮层小胶质细胞被激活，GB20mg&g能明显抑制小胶质细胞的活化。RT-PCR结果表明：小鼠缺血再灌注2天后大脑皮层缺血区TNF．0【，IL．19，iNOSmRNA的表达明显增高，GB能明显下调TNF．a，IL．113，iNOSmRNA的表达(P<0．05，P<0．01)。Westem．blot结果亦证明：缺血再灌注12小

7、时后小鼠大脑皮层缺血区p53的水平明显增高(P

8、亡II作者：葛建彬指导教师：秦正红教授InhibitionofNF．r,Bactivationisassociatedwithanti-inflammatoryandanti—apoptoticeffect