紫茎泽兰挥发油的提取分离及抗菌作用初探

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1、重庆医科大学硕士学位论文紫茎泽兰挥发油的提取分离及抗菌作用初探姓名:刘松鑫申请学位级别:硕士专业:药理学指导教师:杨俊卿201205重庆医科大学硕士研究生学位论文紫茎泽兰挥发油的提取分离及抗菌作用初探摘要目的:紫茎泽兰(EupatoriumadenophorumSpreng)属菊科泽兰属,原产地是中美洲墨西哥、牙买加一带,由于其惊人的繁殖能力,20世纪中叶开始入侵中国,目前己在云南、四川、重庆、贵州、广西等地区蔓延,对我国农业、畜牧业和林业等造成了严重危害。为此,各地都纷纷开展多种方法进行综合治理。有研究资料表明,紫茎泽兰茎叶的提取物对螨虫、蚜虫等具有杀灭能力,对番茄青枯

2、菌等植物病原菌、对白色念珠菌等真菌和金黄色葡萄球菌等细菌也具有杀灭活性。但是,紫茎泽兰挥发油成分容易受地理环境、季节温度等因素的影响,国内外对紫茎泽兰挥发油的抗菌作用研究资料也较少。本研究从攀西地区紫茎泽兰中提取挥发油,对其p一榄香烯进行分离鉴定,并对紫茎泽兰挥发油的抗菌作用及机制进行初步探讨,为深度开发和利用紫茎泽兰提供基础资料。方法:1.用水蒸汽蒸馏法从紫茎泽兰中提取挥发油,硅胶柱层析法、银离子配位色谱法从紫茎泽兰挥发油中分离B一榄香烯,并用高效液相色谱法(HPLC)测定紫茎泽兰挥发油中13一榄香烯的含量。并通过Uv、IR、1H—NMR、13C~NMR和HRMS对其分

3、子结构进行确认。重庆医科大学硕士研究生学位论文2.用纸片扩散法观察紫茎泽兰挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大肠杆菌(Escherichiacoli)和白色念珠菌(Candidaalbicans)的抑菌圈、用二倍管稀释法测定紫茎泽兰挥发油对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)。3.通过测定电导率、生长曲线法、SDS/PAGE电泳、DAPI染色研究紫茎泽兰挥发油对金黄色葡萄球菌细胞形态、菌体生长情况、可溶性蛋白的表达和核酸合成的影响。结果:紫茎泽兰中D一榄香烯的含量为0.497%。紫荆泽兰挥发油三种供试菌抗菌作用大小顺序为:金黄色葡萄球菌

4、>白色念珠菌>大肠杆菌。紫茎泽兰挥发油对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)是200“UmL。紫茎泽兰挥发油作用前后,金黄色葡萄球菌的电导率、生长曲线、SDS/PAGE电泳谱带和DAPI染色后的荧光现象有不同变化。结论:水蒸汽蒸馏法从紫茎泽兰中提取挥发油简单、可行,并可进一步分离得到B一榄香烯;紫茎泽兰挥发油对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,其机制可能涉及影响金黄色葡萄球菌细胞膜完整性、可溶性蛋白和核酸合成来抑制菌体生长,造成菌体破裂、死亡。关键词:紫茎泽兰,挥发油,B一榄香烯,抗菌作用,机制重庆医科大学硕士研究生学位论文EXTRACTIONANDANTIBACTERI

5、ALEFFECTOFTHEESSENTIALoILSFRoMEUPAToRIUMADENoPHORUMSPRENGABSTRACTObjective:EupatoriumadenophorumSprengisanEupatoriumjaponicumgenusofthetribeCompositaegrowninMexicoandJ锄aicaaswellaSSouthandSouthweastinChina,whichcausedseriousharmtoagricultureandanimalhusbandry.PreviousstudiesshowedthatE.ad

6、enophorumhadagoodantibacterialactivityonmites,aphids,RalstoniasolanacearumandCandidaalbicans.However,fewstudieswerereportedaboutantibacterialeffectofessentialoilsfromE.adenophorum.ThisstudywasdesignedtoextractandseparateessentialoilsfromE.adenophorumandprimarilyobservetheantibacterialeffe

7、ct.Methods:ThemethodofsteamdistillationwasusedtoextractessentialoilsfromtheleafandtenderstalkofE.adenophorum.13.elemenewasseparatedbysilicagelcolumnchromatographyandsilverioncoordinationchromatographyfromessentialoils.Thelevel4重庆医科大学硕士研究生学位论文of13.elemenewasmeasuredb

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