天然牛黄与酶促牛黄中胆酸类成分的血清药物化学研究

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1、目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·5符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·1o第一部分胆酸类成分血药浓度测定方法的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11日盯舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯v⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·12方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29第二部分天然牛黄与酶促牛黄胆酸类成分的血清中移行成分⋯⋯⋯⋯30前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30日巧百⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯”⋯””⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘3U材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31方法⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34{寸论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42结1竺三o．oolooooo．ou,oIooooooolo．o·o．10·ooeooolo·ollBoIooolo···o···oo+㈣。⋯⋯·zI：；材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯二二：!。⋯⋯．44方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯。45结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯56参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．58综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．62致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．70论文原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．·7l天然牛黄与酶促

5、牛黄中胆酸类成分的血清药物化学研究研究生：韩衍银专业：药理学导师：齐永秀教授中文摘要第一部分胆酸类成分血药浓度测定方法的建立目的建立大鼠血清中胆酸类的HPLC—ELSD分析测定方法，为两种牛黄血清药物化学及药代动力学研究提供依据。方法(1)色谱柱：AgelaVenusilMPCls(4．6mmx250mm，5pIn)色谱柱，0．2％甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1．0ml·rain-1；蒸发光散射检测器(ELSD)；柱温87．5"C，氮气流速2．0L·m．m-1，ImpactOFF进行检测。(2)血清样品处理的方法：取血清100p1，加入甲醇900l_tl，

6、涡旋混匀，12000rpm离心5min；取上清液，0．221J．m微孔滤膜过滤；取滤液900pI，37"C水浴氮气吹干，固体残留物于一20。C低温冷冻保存，测定前取出备用。固体残留物用100p1流动相溶解，涡旋混匀，12000rpm离心5min，取201．d进样分析。结果该分析方法的检测限为llag·ml～，定量限为51．tg·Inrl。重复性和稳定性考察RSD％值均小于3．91；提取回收率的RSD％值小于3．67。符合生物样品分析方法的限度要求。结论本实验建立了测定大鼠血清中胆酸类含量的HPLC—ELSD法，该方法专属性强，样品处理方法简单、快捷，为药代动力学及血清

7、药物化学的研究提供了检测技术。第二部分天然牛黄与酶促牛黄胆酸类成分的血清中移行成分目的对灌胃给药天然牛黄与酶促牛黄的大鼠血清进行HPLC．ELSD、HPLC—MS分析，确认二者的入血成分和血中移行成分，从药效物质基础方面论证酶促牛黄替代天然牛黄的可行性。方法(1)色谱柱：AgelaVenusilMPC18(4．6mmx250mm，50aaa)柱；流动相：乙腈(A)，0．2％甲酸水(B)，梯度洗脱，0min为30％A、70％B，15min为55％A、45％B，30min90％A、10％B；流速：1．0ml·miD-1；柱温：25"C；检测器：蒸发光散射