sdf-lαcxcr4信号对角膜新生血管形成的作用及其可能机制

《sdf-lαcxcr4信号对角膜新生血管形成的作用及其可能机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：雏日期：坟删．，．矽苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏

2、州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在年月解密后适用本规定。非涉密论文囱论文作者签名：导师签名：期：堡丝：五：塑期：≥生【垒：芏兰SDF一1cWCXCR4信号对角膜新生m管形成的作用及j1．。，能机制中文摘要SDF．I伐／CXCR4信号对角膜新生血管形成的作

3、用及其可能机制中文摘要背景与目的新生血管性眼病包括：感染或化学伤所致的角膜新生血管；虹膜表面及房角新生血管；合并纤维血管膜形成导致房角关闭而产生的新生血管性青光眼；脉络膜新生血管导致的年龄相关性黄斑变性以及视网膜新生血管而致的增殖性视网膜病变等眼病。角膜感染或化学伤后，炎性细胞尤其是单核／巨噬细胞浸润是主要的病理变化。迄今为止，新生血管性眼病的确切发病机制尚不明了，因而尚缺乏确切有效的药物预防或治疗手段，所有针对以上新生血管性眼病的治疗方法及其疗效均不甚理想，从而使以上眼病成为致盲的主要原因之一。据1990年以来国内四川、湖北、浙江

4、和山东的资料显示，角膜病变致盲约占我国致盲疾病的1／4。由此，针对新生血管性眼病确切发病机制及防治的研究也就显得极其重要。SDF．1Cc／CXCR4是一对信号分子。CXCR4在单核细胞、淋巴细胞、造血和内皮干祖细胞等有广泛表达，受其配体SDF一10UCXCLl2激活作用后，能发挥介导细胞的趋化、粘附、增生、凋亡等作用。CXCR4在血管内皮细胞上表达的研究报道提示，SDF．1a／CXCR4对新生血管的形成发挥重要作用。已有报告SDF．1a／CXCR4信号在脉络膜新生血管、糖尿病视网膜病变、缺氧诱导视网膜病变等眼部新生血管疾病中发挥重要

5、的作用。而SDF．1a／CXCR4信号对角膜新生血管形成发挥的作用仍未阐明。为进一步明确SDF一1a／CXCR4对角膜新生血管形成的具体作用机制，本实验利用碱烧伤法构建角膜新生血管模型，局部滴用SDF一10【中和性抗体或CXCR4拮抗剂，观察新生血管发生情况，并从基因和蛋白水平检测相关因子表达。通过培养小鼠巨噬细胞，以SDF—let重组蛋白、SDF—la中和抗体及CXCR4拮抗剂进行处理，观测SDF一10【重组蛋白、SDF一1仪中和抗体及CXCR4拮抗剂对巨噬细胞VEGF分泌的影响。为探索SDF一1a／CXCR4信号在眼部新生血管发

6、生中的作用及其可能机制提供实验依据。材料与方法1、30只BALB／c小鼠制作左日艮碱烧伤诱导实验性角膜新生血管(CRNV)模型，l中文摘要SDF一10t／CXCR4信‘、}对角膜新生』flI管形成的作用及其可能机制通过眼局部滴药随机分为10p,g／mLSDF—lot中和性抗体实验组、5pg／mLCXCR4拮抗剂实验组、0．2％透明质酸钠对照组，每组10只，自碱烧伤后分别给予10p．g／mLSDF—lot中和性抗体、5pg／mLCXCR4拮抗剂或O．2％透明质酸钠局部点眼，每同3次，持续1w，碱烧伤后2w裂隙灯显微镜下观察各组角膜的炎

7、症反应、角膜穿孔及新生血管形成情况，并处死小鼠，取碱烧伤眼球行免疫组织化学法检测各组角膜组织中CD31阳性新生血管数目和表达面积，比较各组之间差异，分析SDF．10t中和性抗体和CXCR4拈抗剂对CRNV形成的影响。2、同样方法及分组构建碱烧伤模型。取上述药物干预后2d、4d和7d等时间点角膜组织标本，抽提总RNA后，RT—PCR法检测各组VEGF等分子mRNA的表达，比较各组之间的差异，并进一步检测各分子蛋白水平的表达。分析CXCR4拮抗剂对碱烧伤角膜中VEGF分子表达的影响。3、体外实验验证动物实验。体外培养小鼠腹腔来源巨噬细胞

8、，应用SDF—lot重组蛋白、SDF．10t中性抗体或CXCR4拮抗剂等分子进行干预，检测干预后VEGF的表达。结果重复性实验结果显示；碱烧伤诱导后SDF—ld中和性抗体和CXCR4拮抗剂干预组小鼠CRNV面积比对照组小鼠明显减少，差