腺苷a3受体活化对大鼠脑出血继发性脑损伤炎症反应影响的实验研究

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1、硕士学位论文腺苷A3受体活化对大鼠脑出血继发性脑损伤炎症反应影响的实验研究院（系）、所临床医学院研究生姓名邓川学科、专业神经病学导师姓名唐兴江教授二Ο一二年四月腺苷A3受体活化对大鼠脑出血继发性脑损伤炎症反应影响的实验研究摘要目的：通过建立大鼠尾状核脑出血模型，并给予腺苷A3受体激动剂（CL-IB-MECA）活化腺苷A3受体（A3R），观察腺苷A3受体活化后对脑出血继发性脑损伤中炎性细胞（小胶质细胞、白细胞）、炎性因子（TNF-α）、抗炎因子（IL-10）以及MMP-9的影响，探讨腺苷A3受体激动剂（CL-IB-MECA）对脑出血后继发性脑损伤中炎症反应的影响及其保护作用。方

2、法：1.采取自体血注入大鼠脑尾状核建立大鼠脑出血模型。2．将90只SD大鼠随机分成三组：对照组组、ICH组和治疗组，每组各30只。每组分别采取6个观察时间点，分别为术后6h、24h、2d、3d、5d和7d，每个时间点5只老鼠。3．给药方法：治疗组术前165min和术后180min按体重0.2mg/Kg给予腺苷A3受体激动剂（CL-IB-MECA）。ICH组大鼠在术前以及术后同时间给予同剂量注射生理盐水，假手术组除不注入自体血外，其余与ICH组完全一致。4．术后两小时评价模型是否成功并术后各时间点给予神经功能障碍评分。5．干湿重法测定血肿周围不同时间点脑组织含水量。6．放射免疫

3、法（ELISA法）测定TNF-α，IL-10不同时点在大鼠血肿周围脑组织中含量。7.采用免疫组化以及图像分析技术观察各组不同时点血肿周围脑组织小胶质细胞、MMP-9变化。8．HE染色观察脑组织血肿周围白细胞数变化。结果：1.假手术组在脑出血术后各时间点没有神经功能障碍,无统计学差异(P>0.05)；ICH组和治疗组与假手术组术后各个时间点比较，均有统计学差异（P<0.05）；ICH组和治疗组在2d、3d与其他时间点比较有统计学差异（P<0.05），ICH组和治疗组术后2d与3d时间点比较无统计学差异（P>0.05）；治疗组与ICH组在脑出血术后6小时时间点比较无统计学差异（P

4、>0.05）,但是在24小时、2d、3d、5d以及7d时间点比较有统计学差异（P<0.05)。2.假手术组脑组织含水量在各个时间点比较没有统计学意义（P>0.05），说明假手术组在各个时间点均没有明显脑水肿发生；ICH组和治疗组术后各个时间点和假手术组比较均有统计学差异（P<0.05）,说明ICH组、治疗组脑出血术后均有脑水肿发生；ICH组和治疗组2d和3d与其他各个时间点比较有统计学差异(P<0.05),ICH组和治疗组在术后2d与3d比较无统计学差异（P>0.05）；治疗组和ICH组比较，在术后6小时时间点比较无统计学差异(P>0.05),但是在脑出血术后24小时、2d、

5、3d、5d、7d时间点有统计学差异（P<0.05）,说明治疗组在术后24小时后脑水肿有减轻。3、假手术组各个时间点脑组织TNF-α的含量没有明显变化，无统计学差异（P>0.05）；ICH组和治疗组与假手术组各个时间点比较有统计学差异（P<0.05）；ICH组脑出血术后TNF-α含量在术后2d和3d与其他时间点比较有统计学差异（P<0.05）；2d与3d时间点比较无统计学差异(P>0.05)；ICH组和治疗组比较在6小时时间点无统计学差异（P>0.05）,在24小时、2d、3d、5d以及7d时间点比较有统计学差异(P<0.05)。4.假手术组IL-10含量在不同时间点脑组织中基

6、本无明显区别，无统计学上差异（P>0.05）；ICH组和治疗组与假手术组脑出血术后各个时间点相比较都有统计学意义（P<0.05）；治疗组和ICH组比较，脑出血术后各个时间点均无统计学差异（P>0.05）。5.假手术组脑组织中小胶质细胞没有明显表达；ICH组和治疗组脑组织血肿周围小胶质细胞数量与假手术组各个时点比较均有显著增多；ICH组和治疗组在术后2d和3d与其余时间点比较有统计学差异（P<0.05）；治疗组小胶质细胞数和ICH组相比较，在脑出血术后各个时间点比较均有统计学差异（P<0.05）。6.假手术组血肿周围组织MMP-9没有明显表达，统计学无明显差异（P>0.05）；

7、ICH组术后血肿周围MMP-9数在6小时、24小时、5d、7d与2d比较，有统计学差异(P<0.05)，2d与3d比较无统计学差异（P>0.05）；治疗组和ICH组比较，在6小时、24小时、2d、3d、5d、7d时间点有统计学差异(P