协同刺激分子b7-h3在肺癌转移中作用的初步研究

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1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：奎邀鎏丑日期：知j2、箩．／1苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆

2、、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口一本学位论文属在——年一月解密后适用本规定。非涉密论文口论文作者签名：弛El期：塑』2：』：f垒导师签名：}眦日期：氇∑垦盟指导小组成员张光波博士傅丰庆博士后协同刺激分子B7．It3在肺癌转移中作用的初步研究中文摘要背景中文摘要肺癌是全世界发病率、病死率最高的癌症之一，研究表明肿瘤侵袭和

3、转移是是肺癌的恶性标志和生物学特征，也是导致患者治疗失败和死亡的主要原因，深入研究肺癌侵袭转移相关的基因，有助于探讨肺癌病因学机制，为肺癌的预后预警、分子分型和个体化治疗提供理论依据。已有研究表明，B7．H3分子与肿瘤(肺癌)的侵袭转移密切相关，但确切的机制尚待探讨。目的探索B7一H3途径在肺癌转移中的作用，为研究B7一H3在肿瘤转移中的分子机制奠定基础。方法(1)运用靶向B7一H3mRNA的shRNA(小发夹RNA)转染入肺癌H1299细胞株，并通过荧光显微镜观察、实时定量PCR(real—timePCR)、反转录PCR(ImPcR)和流式检测(flowcyto

4、metry，FCM)的方法验证转染效率。(2)利用B7一H3一H1299(H1299一B7一H3一siRNA)及B7一H3十H1299(H1299一sn—siRNA)，以及cck8、划痕和Transwell实验以及凋亡检测分析B7一H3对肺癌细胞增殖、迁移侵袭以及凋亡的影响。同时，利用B7．H3’H1299及B7一H3+H1299细胞株，自裸鼠皮下接种构建移植瘤模型，体内分析B7一H3在肺癌进展中的可能作用。结果(1)获得稳定转染B7一H3kon。kdown的H1299工程细胞；与对照相比，H1299一B7一H3一siRNA细胞的B7．H3mRNA和B7一H3膜分

5、子的表达下降至极低水平，甚至检测不到；(2)与B7一H3十H1299相比，B7一H3一H1299的增殖、迁移和侵袭能力显著下降，而细胞凋亡增加；(3)体内实验结果显示，B7一H3一H1299荷瘤组小鼠肿瘤生长速度显著低于B7一H3+H1299荷瘤组小鼠。中文摘要协同刺激分子B7．H3在肺癌转移中作用的初步研究结论成功获得B7-H3基因表达抑制的人肺癌H1299细胞株B7一H3一H1299；B7一H3可促进肺癌细胞增殖、迁移和侵袭，并可以减少细胞凋亡，体内实验证实B7一H3途径具有促进肺癌细胞生长和转移的作用。关键词：肺癌；B7一H3；RNA干扰；H1299；侵袭转

6、移II作者：李淑湘指导老师：张学光协同刺激分子B7．H3在肺癌转移中作用的初步研究英文摘要Thqpreliminaryresearch‘ntherohofB7．H3inthqlepreliminaresearchintherolethe-jmetastasisoflungcancerAbstractBackgroundLungcancerisoneofthemostcommonanddeadlycancerintheworld．Studiesshowthattheinvasionsandmetastasesarethesignofbiologyandmaligna

7、ncy,anddistantmetastasesarethemajorcausesofdeathinthepatientswithlungcancer．AlargenumberofstudieshavefoundtheexpressionofimmunoregulatoryproteinB7一H3inlungcancerwascloselyassociatedwiththetumormetastasis(1ungcancer)，buttheexactmechanismisremainedtobeexplored．AimThisstudyaimedtoexplore

8、thero