线粒体融合蛋白2在绒毛组织中的表达与其与胚胎发育相关性的探讨

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1、华中科技大学硕士学位论文PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应PMSFPhenylmethan-sulfonylfluorid苯甲基磺酰氟PVDFPolyvinylidenedifluoride聚偏氟乙烯quantitativereversetranscriptionpolymerase荧光定量逆转录聚合酶链反qRT-PCRchainreaction应rVSMCsratvesselsmoothmusclecells大鼠血管平滑肌细胞SABCStreptAvidin-BiotinComplex链霉素亲和素生物素复合物SDSSodiumdodecyl

2、sulfonate十二烷基磺酸钠Sodiumdodecylsulfonate-polyacrylamide十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺SDS-PAGEgelelectrophoresis凝胶TBETris-BoricacidEDTAbufferTris-硼酸EDTA缓冲液TBSTris-HClbufferTris酸缓冲盐溶液TEMTransmissionElectronMicroscope透射电镜TEMEDTetramethylethylenediamine四甲基乙二胺TdTTerminalDeoxynucleotidylTransferase末端脱氧核苷酸转移酶TrisTri

3、s（hydroxymethyl）aminomethane三羟甲基氨基甲烷Terminal-deoxynucleoitidylTransferase末端脱氧核糖核酸转移酶介TUNELMediatedNickEndLabeling导的原位末端标记法2华中科技大学硕士学位论文线粒体融合蛋白2在绒毛组织中的表达及其与胚胎发育相关性的探讨华中科技大学同济医学院计划生育研究所武汉430030硕士研究生庞文娟导师相文佩副教授中文摘要实验一Mfn2在正常早孕妇女及不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中的定位及定量表达，初步探讨Mfn2与胚胎发育的相关性目的检测线粒体融合蛋白2(Mitofusin

4、2，Mfn2)在正常早孕妇女及不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中的定位及定量表达，初步探讨其与胚胎发育的相关性。方法采用免疫组织化学法（Immunohistochemistry,IHC）和荧光定量逆转录－聚合酶链反应（quantitativereversetranscriptpolymerasechainreaction，qRT-PCR）检测Mfn2在30例正常早孕妇女及35例不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中的表达情况。结果Mfn2在正常早孕妇女及不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中均有表达，主要分布在绒毛滋养层细胞(villustrophoblasticcells)的胞浆中，以

5、细胞滋养层细胞(cytotrophoblast)中更为明显，不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中Mfn2mRNA的相对表达量显著低于正常早孕妇女（P<0.01）。结论Mfn2定位于人胚胎绒毛滋养层细胞胞浆中，且在不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中的相对表达强度显著弱于正常早孕妇女，提示Mfn2可能与胚胎发育有关，一定量的Mfn2表达有助于正常早孕的维持。关键词线粒体融合蛋白2；胚胎停止发育；绒毛组织；滋养层细胞3华中科技大学硕士学位论文实验二Mfn2与胚胎发育过程中绒毛滋养层细胞凋亡相关性的探讨目的研究正常早孕妇女及不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中细胞凋亡情况及Mfn2、Bcel

6、llymphoma-2(Bcl-2)和Bcl-2AssociatedXProtein(Bax)的蛋白表达情况，探讨Mfn2与胚胎发育过程中绒毛滋养层细胞凋亡的相关性。方法采用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位末端标记法（Terminal-deoxynucleoitidylTransferaseMediatedNickEndLabeling,TUNEL）和蛋白印记（westernblot）检测实验一中12例正常早孕妇女及12例不明原因胚胎停育者绒毛组织中的细胞凋亡情况及Mfn2、Bcl-2和Bax的蛋白表达情况。结果不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中滋养层细胞凋亡指数(Apopt

7、osisindex,AI)明显高于正常早孕妇女（P<0.05）。Mfn2及Bcl-2蛋白在不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中的相对表达显著低于正常早孕妇女（P<0.01），而前者绒毛组织中Bax蛋白的相对表达显著高于后者（P<0.01）。结论与正常早孕妇女相比，不明原因胚胎停止发育者绒毛滋养层细胞凋亡明显增加，且正常早孕妇女及不明原因胚胎停止发育者绒毛组织中Mfn2的相对表达与Bcl-2呈正相关，与Bax呈负相关，提示Mfn2可能通过调节滋养层细胞凋亡参与胚胎发育过程。关键词线粒体融合蛋白2；胚胎停止发育；细胞凋亡；