脂质体毛细管电泳研究进展

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1、http://www.hxtb.org化学通报2006年第69卷w057脂质体毛细管电泳研究进展肖玉秀梅洁程伟(武汉大学药学院武汉430072)摘要脂质体毛细管电泳是近年新发展起来的一种分离分析技术。本文较系统地综述了脂质体毛细管电泳的脂质体制备方法、分类、原理、脂质体涂层制备方法以及应用，以期促进脂质体毛细管电泳的发展。关键词脂质体毛细管电泳ProgressinLiposomeCapillaryElectrophoresisXiaoYuxiu,MeiJie,ChengWei(CollegeofPharmacy,WuhanUniversity,Wuhan430072)AbstractLipos

2、omecapillaryelectrophoresis(LCE)isarecentapproachandplayingmoreimportantroleintheseparationandanalysisprocess.Inthisreview,thepreparationofliposome,classification,theory,preparationofliposomecoatingonthecapillaryinnerwallandapplicationsofLCEaredescribedindetail.KeywordsLiposome,Capillaryelectrophore

3、sis[1]自1965年由英国的Bangham等首先发现磷脂在水中可以自发形成脂质体(Liposome)以来，对脂质体的实验研究日渐广泛，已遍及生命科学、膜工程学等领域，并逐渐向临床应用发展。脂质体是由磷脂和其它两亲性物质分散于水中形成的由一层或多层同心脂质双分子膜包封而成的球状体，具有亲水性和疏水性两性性质。依其所含脂质双分子层的层数，脂质体可分为单室脂质体和多室脂质体。其中单室脂质体又可根据粒径的大小分为小单室脂质体(粒径范围0.02～0.08μm)和大单室脂质体(粒径范围0.1～1μm)。随着生物膜色谱(BiomembraneChromatography)的发展，脂质体作为一种分析工具受

4、到了越来越[2,3]多的关注，并成为近年来较为活跃的研究领域。生物膜色谱是一种新型液相色谱模式，它以天然或人工模拟生物膜为固定相，主要用来研究溶质分子与生物膜间的相互作用。目前，最常用的生物[4~6]膜色谱固定相是固定化脂质体，因为它能更好地模拟生物膜的脂双层结构，并具备生物膜的流动性特征。这种人工模拟的生物膜体系不仅可以精确地模拟生物膜的化学环境，而且其物理性能也可以通过调节温度、pH、离子强度等得到有效控制。固定化脂质体色谱具有许多优点，但是它的应用并不广泛，主要原因是制柱比较困难、成本高。其次高效液相色谱(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)

5、常用的硅胶基质及其化学键合固定相的pH适用范围较窄(2～8)，色谱柱易被污染且难再生，流动相需要大量有机溶剂，成本较高，且污染环境。与固定化脂质体色谱相比，脂质体毛细管电泳(LiposomeCapillaryElectrophoresis，LCE)[7]更有优势，其具有制备简便、溶剂消耗少、进样量小、成本低等优点。1995年Zhang等首次提出了LCE的概念，10年来，LCE已经得到了较快发展，无论是在方法学方面，还是在应用方面都有了比较深入的研究。肖玉秀女，39岁，博士，副教授，主要从事药物分析研究。E-mail:yuxiuxiao@yahoo.com.cn武汉大学回国留学人员启动基金资助项

6、目(502-276130)2005-08-25收稿，2006-01-11接受http://www.hxtb.org化学通报2006年第69卷w0571脂质体的制备[8~10]目前，脂质体的制备技术已经相当成熟，有关报道和综述也较多。常用脂质体制备方法有薄膜分散法、注入法、超声分散法、冷冻干燥法、冻融法、逆相蒸发法、复乳法等。LCE中所用的脂质体主要是单室脂质体。多室脂质体由于背景噪声大，灵敏度低而不适合。与[11]固定化脂质体色谱相比(毛希琴等曾对固定化脂质体色谱中脂质体的制备方法作过较为详细的介绍)，LCE中的脂质体制备方法比较单一，通常采用薄膜-超声分散法和薄膜-挤压分散法。薄膜-超声分散

7、法是制备单室脂质体的最早方法，即将磷脂、胆固醇等类脂质溶于有机溶剂中，旋转蒸发除去有机溶剂，使在烧瓶内壁形成薄膜，然后将水溶性介质加入烧瓶中并不断振荡，得到多室脂质体，最后经超声处理得到单室脂质体，其粒径大小依超声时间的长短而不同。薄膜-超声分散法的缺点是其制备的脂质体粒径分布不太均匀，内层的磷脂分子数要小于外层的磷脂分子数，热力学不稳定，[12]脂质体之间容易发生融合。薄膜-挤压分散法是目前制备