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时间:2019-02-28
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1、应用NCBI的Mapviewer查找基因序列、mRNA序列、启动时间:2011-06-0822:23来源:生物吧作者:刘浩点击:796次一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA、Protein、引物设计、BLAST序列比对等(作者:urbest)关键词:NCBI使用方法引物设计序列比对总共分为四个部分介绍一下NCBI的使用:Partone一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA、Protein、引物设计、BLAST序列比对等(作者:urbest)关键词:NCBI使用方法
2、引物设计序列比对总共分为四个部分介绍一下NCBI的使用:Partone如何查找基因序列/mRNA/PromoterParttwo如何查找连续mRNA/cDNA/蛋白序列Partthree运用STS查找已经公布的引物序列Partfour如何运用BLAST进行序列比对、检验引物特异性Partone:利用Mapviewer查找基因序列、mRNA序列、启动子(Promoter)[同一个页面即可显示基因序列和启动子]下面以人的IL6(白细胞介素6)为例讲述一下具体的操作步骤一、打开Mapviewer页面,网
3、址为:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/mapview/index.html在search的下拉菜单里选择物种,for后面填写你的目的基因。操作完毕如图所示:二、点击“GO”出现如下页面:三、在步骤二图示的右下角有一个QuickFilter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter,出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本
4、相同。尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。现在普遍采用的是最上面的那个序列,这一条是世界范围的生物科学家用计算机合成的一个序列。我也推荐大家使用这个序列。四、点击上述三条序列第一条序列(即reference)对应的“Genesseq”,出现新的页面,页面下方为:五、点击上图出现的“Download/ViewSequence/Evidence”,即下载查看序列等功能,结果如图所示:先对上面这张图做点简要的说明,在SequenceFormat(序列输
5、出格式)后面是一个下拉式选择菜单,默认的为FASTA格式,还有一个是GenBank格式。我推荐大家选择GenBnak格式,因为这个格式提供了很多该基因的信息,而FASTA格式只有基因序列。六、在SequenceFormat后选择GenBank,然后点击下面的Display,目的基因的相关信息和序列就出现在眼前了。点击后如图所示(网页较大,只抓取一小部分以作示范):在上述打开的网页中,你可以看到基因长度,基因序列,以及这个基因是如何被报道出来的等各种信息。你会看到:mRNAjoin(3598..36
6、78,3841..4031,5090..5203,5911..6057,7803..8394)这代表了从基因的3598位开始就是转录区了,即我们常说的mRNA片断,由于内含子的存在,所以mRNA在DNA序列上分成了几段。CDSjoin(3660..3678,3841..4031,5090..5203,5911..6057,7803..7970)CDS代表编码序列,即蛋白编码区是从3660开始的(ATG),由于剪接作用所以CDS区也是不连续的。说到这里,可能很多朋友都已经明白了promoter即启动
7、子区域在哪里了。但我还是再唠叨几句:转录起始位点前面是基因的调控区,启动子区没有明显的位置定义,大家也只是猜测它的大体位置,如果你要研究promoter区的话,建议你选择转录起始位点前的2000个碱基进行研究,一般默认的是这样。当然你如果觉得长度太长不好研究的话,也可以只研究-1000到0这一千个碱基,因为一般情况下,启动子区的变异都在这个区域内。这样大家就可以找到自己的目的基因序列和启动子了,这种方法可能使用的人不是很多,但我个人比较喜欢,因为它最大的优点是可以找到启动子区域和其他调控区域。(责
8、任编辑:大汉昆仑王)
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