斑节对虾抗wssv家系筛选

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1、学校代码：10264研究生学号：M090101079上海海洋大学硕士学位论文题目：斑节对虾抗WSSV家系筛选ScreeningfamiliesofPenaeus英文题目：monodonforresistancetothewhitespotsyndromevirus(WSSV)专业：水产养殖研究方向：斑节对虾遗传育种及抗病选育姓名：张涛指导教师：江世贵研究员二O一二年六月ScreeningfamiliesofPenaeusmonodonforresistancetothewhitespotsyndromevirus(WSSV)ADissertationSubmitte

2、dByTaoZhangForTheDegreeofMasterofAgronomySupervisor:ProfessorShiguiJiangSpeciality:AquacultureShanghaiOceanUniversityShanghai201306,P.R.ChinaSouthChinaSeaFisheriesResearchInstitute,CAFSGuangzhou510300,P.R.ChinaJune,2012上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取

3、得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保

4、密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注主席委员委员委员委员委员委员秘书答辩地点答辩日期上海海洋大学硕士学位论文斑节对虾抗WSSV家系筛选摘要自1993年对虾白斑综合征病毒（WhiteSpotSyndromVirus,WSSV）爆发以来，我国对虾养殖业曾遭受重创，但随着WSSV流行病学和控制技术的研究、养殖技术和模式的改进，我国对虾养殖的产量和规模逐渐得到恢复和发展，目前对虾养殖产量每年可达到130多万t以上，但目前WSSV仍严重威胁着我国对虾养殖业的发展。培育在一

5、定程度上抗WSSV的对虾新品种是解决我国对虾养殖业目前困境的有效途径之一。WSSV宿主极其广泛，对虾在养殖过程中普遍存在WSSV潜伏感染，携带少量病毒的对虾可以在良好的环境下继续生存而不暴发白斑综合征。由于此前在斑节对虾抗WSSV家系筛选时仅仅从定性的角度分析了对虾的死亡规律，而没有从定量的角度来选定合适的筛选浓度以及分析对虾肌肉内病毒含量的变化。本研究322利用3种浓度WSSV粗提液（3×10、6×10、2×10copies/mL）和PBS液注射感5染病毒携带量约1×10copies/g的斑节对虾，研究了斑节对虾的死亡规律、肌肉内病毒含量的变化、总血淋巴细胞数及不

6、同血淋巴细胞的比例变化、5种免疫酶（ACP、AKP、PO、POD、SOD）活性的变化，建立了斑节对虾抗WSSV家系筛选的方法，并初步应用于37个斑节对虾家系的抗病筛选，选出了5个生长速度、抗病能力相对较强的家系。主要研究结果如下：1.3种浓度WSSV感染下，斑节对虾累积死亡率分别为（93.33±2.89）%、（56.67±5.77）%和（45.00±5.00）%，对虾肌肉内病毒含量均在48h达到最大10值，濒死对虾肌肉内病毒含量均达到10copies/g数量级。从对虾死亡规律及体内病毒含量来看，实验所用对虾WSSV毒力较先前报道没有变化；极少量的WSSV引起了潜伏感

7、染WSSV的对虾暴发性死亡。对照组没有出现死亡，表明潜伏感染WSSV的对虾在没有外来病原刺激的情况下未发病死亡。2.3种浓度WSSV感染下，除个别时间点外，对虾总血淋巴细胞数的变化规律与肌肉中WSSV的扩增规律成负相关；半颗粒细胞所占比例最大，且初期呈现显著上升的趋势，后期比例虽有起伏但均维持在较高水平；颗粒细胞与透明细胞比例初期均显著下降，后期颗粒细胞比例显著低于初期，而透明细胞比例则与初I上海海洋大学硕士学位论文期无显著性差异。3.3种浓度WSSV感染下，ACP、AKP、SOD活性总体呈现先上升后下降随后上升的趋势，其中SOD活性后期显著高于初期水平；PO、