禹白附和虎掌南星刺激性毒性成分的研究

禹白附和虎掌南星刺激性毒性成分的研究

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时间:2019-02-28

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1、摘要禹白附和虎掌南星刺激性毒性成分的研究本课题来源于“十一五”国家科技支撑计划项目(编号:2006BAl09806.10o禹白附、天南星与半夏同属于天南星科植物,也都是以复制法炮制的几种常用有毒药材;本文在本课题组前期对半夏的炮制减毒机理研究基础上,对禹白附和天南星(虎掌南星)的刺激性毒性成分进行了研究。研究表明禹白附、虎掌南星的刺激性毒性与半夏类似,两种有毒中药中所含有的草酸钙针晶为其主要刺激性毒性成分,明矾是炮制解毒的主要辅料,解毒机制是使得毒针晶的晶型破坏。主要内容如下:1.文献研究通过查阅国内外文献,就禹白附和天南星的化学成分

2、、药理毒理作用、炮制研究概况作了综述。文献研究表明禹白附和天南星的毒性都主要表现在对黏膜组织的刺激性,但何为刺激性毒№茂分尚无定论。2.药材刺激性毒性成分的初步确定:鉴于有关禹白附的研究报告较少,特别是在化学成分研究方面。本论文首先采用成分预试的方法检测到禹白附药材主要含有生物碱、有机酸、挥发油、糖苷、甾体类等成分;并从禹白附中提取分离了挥发油和含量较高的有机酸部位,进行了GC-MS分析。以水和各有机溶剂分别制备禹白附与虎掌南星生药材的提取物,同时提取药材针晶,经家兔眼刺激性试验表明:药材水及各有机溶剂提取物(各提取液经镜检均无针晶)

3、、水溶性蛋白及禹白附挥发油、草酸钙化学对照品都没有刺激性;一,,——————————————————、.一.一—————————————————一而与空白对照组比较,药材生品粉末和各溶剂提取后的药材残渣对家兔眼结膜的刺激有显著性差异,所提取的针晶的刺激性有极其显著性差异。据此,初步确定药材含有的特殊晶型的针晶为其主要刺激性成分。3.药材针晶的鉴定及含量测定:所提取的禹白附和虎掌南星针晶经x一射线衍射分析,均鉴定为单斜晶系的CaC:0..H20晶体。扫描电镜观察明显可见锐利的针尖、晶体表面的凹槽及倒刺结构,推测这种特殊的晶型可能是其刺激

4、性的物质基础。建立了间接测定草酸钙针晶含量的RP-HPLC法,测得禹白附扣虎掌南星生品摘要中的草酸钙针晶含量分别为O.58%和1.55%。4.药材与针晶的刺激性毒性作用研究:小鼠肠系膜试验表明腹腔注射药材生品、针晶混悬液,均有大量针晶刺入小鼠肠系膜,肠系膜组织细胞肿胀;家兔眼刺激性试验结果表明,刺激性作用随着针晶浓度的增大而增强,刺激性强度和针晶量之间呈现出良好的相关性;急性毒性试验结果也表明,针晶对小鼠腹腔注射的LD,o值远小于药材生品粉末的LD。。。两种药材针晶腹腔注射产生的毒性均分别是其生品的近200倍,说明两种药材中确实具有很

5、强的刺激性毒性,是两种有毒药材的主要刺激性毒性成分。所提药材针晶的Biuret反应呈阳性,表明针晶中除草酸钙以外还含有蛋白类成分。经纯化冻干提取分离针晶蛋白,进行家兔眼刺激试验并与药材水溶性蛋白对照,结果表明针晶结合蛋白具有一定刺激,tek;豚鼠皮肤刺激性试验表明针晶蛋白对破损皮肤有强刺激性;以SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳)法考察药材针晶蛋白与水溶性蛋白的异同,结果表明在同等条件下针晶蛋白在20~66KD有几条谱带是水溶性蛋白所没有的。推测针晶蛋白的特殊谱带所对应的蛋白可能是针晶蛋白产生刺激性的主要组分。5.药

6、材白矾炮制减毒机理的初步探讨鉴于禹白附和天南星均用白矾(明矾)以复制法炮制,取两种药材针晶分别以8%的白矾溶液浸泡,结果发现针晶数量下降,且均有溶蚀、断截的形态变化,对家兔眼结膜的刺激性也大为降低。因此认为刺激性毒性成分的炮制减毒机理在于:药材经炮制后,主要由于白矾的作用使得药材所含有的草酸钙针晶的特殊晶型被破坏、含量下降,故对机体的刺激性每l生降低。关键词:禹白附;虎掌南星;刺激性毒性成分;草酸钙针晶IIAbstractStudiesonirritanttoxiccomponentsofTyphoniumgiganteumEn91.

7、andPinelliapedatisectaSchottThetopiccamefrom‘'eleventhfive—yearplan”NationalTechnologySupportingProject(No.2006BAl09806·10).7多phoniumgiganteumEn91.,PinelliapedatisectaSchott.andPinelliaternata(Thunb.)BreitareallbelongtothefamilyofAraceae.TheyarecommonlyusedtoxicChinesem

8、edicinalmaterialsprocessedbyduplicatingmethod.Mystudyonirritanttoxiccomponentsof砂phoniumgiganteumEn91.andPinel

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