的耐药机制及院内感染的流行病学研究

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1、论文题目：泛耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制及院内感染的流行病学研究答辩委员会委员：鱼墓壑塾援≤显趔医堂医生佥型堂瞳≥韭亘羞塾援≤显趔医堂院基础医堂瞳≥’。-．I罗I‘I-■■I-r’；。．。，3温州医学院硕士学位论文缩写ABPRABACRABPDRCLSIMICPCRqRT-PCRISPBPESBLsCCCPIM【PGENTOBCIPCAZCROAKFOXmmlSeCmln中英文缩写和中英文全称对照表英文名称AcinetobacterBaumanniiPan—drugResistantAcinetobacterBaumanniiCarbape

2、nem—resistantAcinetobacterbaumanniiPan．drugResistantClinicalandLaboratoryStandardInstituteMinimalInhibitoryConcentrationPolymeraseChainReactionReal—timeQuantitativeFluorescentIU’-PCRInsertSequencePenicilin—BindingProteinExtended．．Spectrum13．．LactamasesCarbonylCyanidemChlo

3、rophenylhydrazoneImipenemGentamycinTobramycinCiprofloxacinCeftazidimeCefifiaxoneAmikacinCefoxitinMicroliterMilliliterSecondMinute4中文名称鲍曼不动杆菌泛耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌泛耐药临床实验室标准化研究所最小抑菌浓度聚合酶链反应实时荧光定量逆转录PCR插入序列青霉素结合蛋白超广谱B．内酰胺酶碳酰氰基．对．氯苯亚胺培南庆大霉素妥布霉素环丙沙星头孢他啶头孢曲松阿米卡星头孢西丁微升毫升秒分钟温州医学院

4、硕士学位论文泛耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制及院内感染的流行病学研究中文摘要目的：通过泛耐药鲍曼不动杆菌(PandrugResistanceAcinetobacterBaumanniiPRABA)随机扩增DNA多态性(RAPD)基因型同源性分析，以用于院内感染的追踪控制和流行病学的调查研究；检测医院内PRABA外排泵adeB基因表达水平；用PCR方法筛查超广普13一内酰胺酶(ESBLs)、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)、喹诺酮类拓扑异构酶(gy_rA，pazC)、亚胺培南特异性通道蛋白(CarO)基因，探讨PRABA菌株不同耐药机制与临床常用抗

5、菌药物之间的关系。方法：1．利用Walkaway96SI全自动细菌鉴定仪NUC33复合检测板从临床标本中鉴定鲍曼不动杆菌(AcinetobacterbaumanniiAB)及药敏情况，44。C和41℃孵育实验排除溶血不动杆菌。2．随机扩增DNA多态性(RAPD)方法对PRABA分离株进行基因型同源性分析，包括RAPD电泳图，Cross—checker软件二进制数据转换，NTSYSpc2．10与SPSSl5．0软件根据二进制的矩阵数据，计算出遗传距离并绘制亲缘关系树状图，同时利用WHONET5．4对AB及PRABA分离株进行流行病学表型分析

6、。3．用M—H琼脂稀释法检测所分离PRABA对目前临床常用抗菌药物头孢噻肟(CTX)、环丙沙星(CIP)、庆大霉素(GEN)、四环素(TET)、头孢西丁(FoX)、亚胺培南(IMP)的最小抑菌浓度(MinimalInhibitoryConcentrationMIC)及外排泵抑制剂碳酰氰基一对一氯苯腙(CCCP)，维拉帕米处理前后PRABA各抗生素MIC值的变化。4．实时荧光qRT—PCR检测PRABA外排泵adeB基因及其表达水平；16SrRNA为内参基因，测定逆转录后模板中总eDNA的量进行校正，根据PCR动力学经典算法：QR=(I+E

7、)△蝴对基因表达进行相对定量分析。5．聚合酶链反应(PCR)检测超广普B一内酰胺酶(ESBLs)，氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因，喹诺酮类拓扑异构酶(gy_r'A、pa_rC)，亚胺培南特异性通道蛋白(CarO)基因6．质粒制备及转化实验分析PRABA菌株质粒所携带的耐药基因。温州医学院硕士学位论文结果：1．2007年全年分离3株PRABA菌株，全部来自ICU，占AB分离率的3％；2008年全年分离28株PRABA菌株，其中ICU26株，呼吸内科1株，骨科l株，占AB分离的9．3％，除l株来自伤口脓液外，全部来自痰液标本；2009全年分

8、离到34株PRABA，其中ICU29株，非ICU5株，占AB分离的11．6％。2．临床分离的PRABA菌株可分为6个RAPD型，ICUl存在A、B两个克隆株，且以A为主，两克隆株之间的同源性为