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1、淀粉酶糖蛋白在BME-UV肿瘤坏死要素增加在人乳腺表皮细胞体外模型的表达作者：略摘要：糖蛋白是一种属于ATP结合盒基因超家族的喷流泵可以影响药物的利用度和药性。乳腺表皮细胞显示不同的药物运输者，包括糖蛋白，即使在比较低的程度。在炎症期间，和上皮屏障功能变化联系起来的是，促炎性因子，如肿瘤坏死淀粉在奶和血清中是升高的。在这项研究中，TNF-A的作用调节确定为BME-UV细胞中，一个不朽的牛乳房上皮细胞株。糖蛋白和核苷酸蛋白质生产在BABCCB1的表现，基因编码糖蛋白，在TNF-A24小时曝光后增加。最高的观察效果是在TNF-A曝光72小时后，蛋白质和核苷酸表现也在
2、TNF-A处理120小时候显著增加，但低于72小时后观察到的效果。从顶点到几点的地高辛流量，糖蛋白集体，在TNF-A曝光后降低。当维拉帕米时得到逆转，已知化合物和糖蛋白的作用，和地高辛一起添加到供体室。丙磺舒,一种和有机阴离子转运蛋白产生反应的化合物，不是糖蛋白，没有增加地高辛的流出。该模型对于理解的乳房上皮屏障功能具有重要意义,提供糖蛋白在奶和血清中积累或者排除外源性物质作用的深刻观察。12介绍：不同动物的身体由物理屏障建立和修改容积和成分包括物质成分而区分不同。生物屏障功能的概念已经转向了从静态的屏障,复杂的交通系统,包括各种膜转运蛋白。射流泵是一个家庭的A
3、TP-dependent运输蛋白表达在几家主要报导生理障碍包括血脑屏障(BBB)肾、小肠和胎盘[1-3]乳腺上皮屏障,绝大多数的血浆和牛奶的特征，表达各种药物转运蛋白包括糖蛋白。糖蛋白是一种属于ATP结合盒基因超家族的喷流泵，由于其组织分布和细胞定位糖蛋白在外源性物质吸附、分配和消除发挥重要作用，例如，糖蛋白在洗涮肠道上皮细胞发挥作用，限制吸收和促进分泌口服给药的肠道腔内。在肝脏，糖蛋白在微观肝细胞表面，促进排泄的药物及其代谢产物进行分子、毒素的胆汁。在肾脏，糖蛋白是表现在顶端表面近端肾小管上皮细胞衬里，在它可以调节消除内源性代谢废物产品和外源性代谢物。在例如血
4、脑屏障等生物屏障方面，表现在内皮细胞膜的毛管处，那里的药物或毒素伸出回毛细血管,所以不会到达大脑吗。糖蛋白可以表现为不同的因素，12包括调制药物、毒剂、热激、炎症、孕妇及哺乳期。几个体外和体内的调查表明，促炎细胞因子和前炎症细胞因子如：TNF-A改变糖蛋白的效果。这些细胞激素的影响,出现在不同层次的调节转录,包括要素和转录后。在炎症反应中，可变化有关乳房上皮屏障功能的细胞因子,前炎性细胞因子，如TNF-a提高的血清和牛奶。TNF-a显著增加是牛奶和血清中大肠杆菌和大肠脂多糖浸泡乳头溢液乳腺，此外,暴露了牛从外周血单核细胞对金黄色葡萄球菌enterotoxins3
5、h导致TNF-a快速生产水平达到了48小时然后最大下降了96小时。前炎性细胞因子的影响TNF-a条例的射流泵在乳房上皮细胞中尚未被报导。Whole-animal模型用于研究前沿性细胞因子表现上和糖蛋白影响总体调控炎症信息活性。然而，促炎性细胞因子的影响在调节蛋白质上调控糖蛋白发布的一系列的内源性细胞复杂。因此,容易加工的体外模型提供的答案为了阐明特定的角色煽动性的光调变器。牛乳腺上皮细胞一个不朽的线(BME-UV)应用于当前的研究。该细胞株曾被选为blood-milk屏障模型由于其表达能力,运输的蛋白质，建立一个细胞极性与规范的相邻间细胞紧密连接,建立跨上皮电阻
6、,类固醇激素及其反应。本研究的目的是确定细胞因子的影响表现上TNF-a和活性的BME-UV糖蛋白细胞。材料与方法12TNF-a调节细胞基因表达的影响在培养细胞bymeasuringmRNABME-UV确定和蛋白水平TNF-a暴露后为选定的时间。影响渗透上皮屏障扩散进行了研究,采用化合物与糖蛋白进行互动。细胞培养BME-UV细胞的培养条件下,类似于那些先前描述的细节。简而言之,剩余BME-UV细胞成长到65-75%在25平方厘米塑料文化烧瓶中。分离和分散细胞被播种在渗透聚酯的支持，使用不对称媒体饲养。典型牛的媒介，含有乳糖和小的电解质浓度相近,此镜血清。顶端方面被
7、暴露在顶端牛介质(ApM)的低乳糖成分electrolyte-high像离子组成的牛奶。TBM的组成和ApM被报道出现。这些细胞被孵化入预热371C/fhumidified氛围中含5%的二氧化碳，媒体在顶端和basolateral方面的细胞被刷新日报，细胞被保存在文化对渗透性支持了两周,形成一个分级、极化和电紧前实验。所有的单层。前沿性细胞因子孵化条件：细胞培养在混合和暴漏在浓度200g/ml的重组牛TNF-A中24,72和120小时在获得RNA和蛋白质或者利用它们进行载体研究之前。在这个范围内TNF-a浓度也已经在牛的乳腺炎日常记录。用电成对细胞过程中,没有暴
8、露在维持TNF-a(母亲
