宫颈癌细胞gm-csf免疫学作用相关性研究

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1、万方数据答辩委员会主席：昌主法塾拯逝塑太堂医堂暄附厘筮三医院答辩委员会成员：奎秉煦麴拯遏趔医科太堂附屋筮二医院直主教拯塑捌医科太堂附届簋三医院万方数据目录

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3、IfllIIIJIIIJlIlUlY2691642中文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．⋯．．1英文摘要⋯．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．⋯⋯．．．．．．．．⋯．．2前言．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．⋯⋯．．．⋯⋯．．．．．．⋯．．．．4材料与方法．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．⋯．

4、．．⋯⋯．．．．．．．．⋯．．5结果．．．⋯．．．．．．．．⋯⋯．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．⋯．．．18分析与讨论．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．24参考文献．．．⋯．⋯⋯．．．．．．．．．．．．⋯．．．⋯．．．．．．．．．⋯．．．26附录．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．⋯⋯．．⋯⋯．．．．．．．．⋯．28致谢．．．．．．．．．．．．．．．⋯⋯．．．．⋯．．⋯．⋯．．．．．．．⋯⋯．．．29综述⋯．．．⋯．．．．．．．．．．．⋯．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．30学位论文独创

5、性声明．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯40万方数据温州医科大学硕士学位论文摘要宫颈癌细胞GM-CSF免疫学作用相关性研究目的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM．CSF)是一种刺激造血干细胞增殖和分化的细胞因子，可诱导粒细胞及巨噬细胞前体细胞集落生长，主要由巨噬细胞和T淋巴细胞分泌，某些肿瘤细胞也可分泌产生，但不同类型肿瘤中肿瘤源性GM．CSF的免疫学作用及其调控机制仍不清楚。本实验通过研究宫颈癌细胞GM．CSF的表达对环氧合酶．2(COX．2)和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响，探讨GM．CSF在宫颈癌发生发展中的作用。方法收集临床

6、宫颈癌标本52例及正常宫颈15例和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织标本2l例作为对照进行免疫组织化学染色，分析宫颈癌组织GM．CSF的表达与COX．2和iNOS表达的相关性；为了从细胞水平进一步论证其相关性，本实验使用宫颈癌细胞系Caski细胞系，Caski细胞经GM．CSF转染后过表达GM．CSF，并通过RT-qPCR和Westernblot检测COX．2和iNOSmRNA及蛋白的表达情况，以空质粒转染的Caski细胞为对照，在细胞模型中探讨GM．CSF强制表达对COX．2和iNOS表达的影响。同时，通过GM．CSFsiRNA干扰Caski细

7、胞GM．CSF表达后，用RT-qPCR及Westernblot方法检测iNOS／COX．2mRNA及蛋白表达情况。结果免疫组化结果显示，宫颈癌组织GM．CSF表达明显低于正常组和CIN组(P均<0．05)，而COX．2及iNOS的表达显著高于正常组(P<0．01)，但与CIN组无明显差异；统计学分析发现GM．CSF与COX．2／iNOS的表达呈负相关(r=一0．542／一0．499)。细胞水平结果显示，与空质粒转染的细胞相比，转染GM．CSF的Caski细胞COX．2／iNOS在mRNA及蛋白表达水平都有显著下降(P均<0．05)；GM．C

8、SF在被干扰后，干扰组与对照组相比COX．2／iNOS在mRNA及蛋白表达水平有明显差异(P均<0．05)。结论在组织和细胞表达水平GM．CSF与COX．2／iNOS的表达均呈负相关，GM．CSF可能通过下调COX．2／iNOS表达而具有抗宫颈癌作用。【关键词】GM．CSF；siRNA；宫颈癌；环氧合酶．2；诱导性一氧化氮合酶万方数据温州医科大学硕士学位论文AbstractCorrelationstudyexpressionofGM—CSFincervicalCanCerobjectiveHumanGranulocyteMacrophage

9、ColonyStimulatingFactor(hGM-CSF)isakindofcytokinewhichcanstimulateproliferationanddifferentiationofbonemarrowhematopoieticcellsaswellasprecursorgranulocyteandmacrophagecells．MostofhGM—CSFissecrectedbymacrophagecellsandTcells．However，GM—CSFhasbeenfoundtobesecretedbyavariety

10、ofsolidtumorscellslinesandmayinvolveinthedevelopmentofhumansolidtumor，buttheimmuneeffecto