复发性自然流产(rsa)相关mirna-27a、瘦素的表达及功能研究

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1、万方数据中图分类号基21垒：21UDC610硕士学位论文学校代码!Q主呈三密级公珏复发性自然流产(RSA)相关miRNA一27a、瘦素的表达及功能研究StudiesOHtheexpressionandfunctionofRSA-·relatedmiRNA··27aandleptin作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：唐最艳临床医学妇产科学中南大学湘雅二医院王新副教授论文答辩日期垒!生：￡：斗-答辩委员会主中南大学．2014年6月万方数据学位论文原创性声明本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致

2、谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者躲衄＼-wJ一日期．斗让月卜日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应

3、本声明。作者签名：扭日期：衅上月乓日月垒日万方数据复发性自然流产(RSA)相关miRNA．27a、瘦素的表达及功能研究摘要目的：1．检验miRNA．27a在正常妊娠与复发性自然流产绒毛组织中的差异表达。验证基因芯片检测结果。2．在HTR-8滋养细胞中过表达与抑制表达miRNA．27a，检测miRNA-27a对瘦素表达的影响，探讨miRNA．27a与瘦素之间的调控关系。3．研究miRNA．27a对人正常滋养细胞(HTR-8)的凋亡的影响，探讨miRNA．27a在复发性自然流产中的作用，为复发性自然流产的研究提供理论依据。方法：1．应用实时荧光定量RT-PCR(Real．timeRT-PCR

4、)方法检测miRNA．27a在15例复发性自然流产患者(实验组)及15例正常妊娠绒毛组织(对照组)中的表达水平。2．采用miRNA过表达与抑制表达技术，在人滋养细胞系(Ⅲ限．8)中过表达与抑制表达miRNA．27a，RT-PCR技术检测在人滋养细胞系中miRNA一27a与瘦素mRNA的表达水平，Western．blot技术检测瘦素蛋白质的表达水平。明确miRNA．27a与瘦素之间在mRNA和蛋白质水平的调控关系。3．在HTR-8细胞中过表达与抑制表达miRNA-27a，采用流式细胞技术检测HTR-8细胞凋亡的变化。结果：1．对照组与实验组绒毛组织中均有miRNA．27a表达，其表达量分别

5、为0．5094i-0．1926和1．2213+0．2455，实验组绒毛组织中miRNA。27a表达高于对照组，P<0．001，差异有统计学意义，与文献报道基因芯片检测结果相符。2．在人滋养细胞系(}r限．8)中，过表达miRNA．27a后，RT-PCR结果显示miRNA．27a的表达增加(P

6、．27a后，Leptin蛋白质的表达降低(P<0．05)，抑制miRNA．27a的表达后，Leptin蛋白质的表达增加(P

7、NA和蛋白质水平miRNA．27a均对瘦素有着明显的负性调控作用。3．过表达miRNA．27a可以增加H限．8细胞的凋亡率，因此在复发性自然流产中高表达的miRNA一27a可能通过促进滋养细胞的凋亡从而参与了复发性自然流产的发病过程。关键词：复发性自然流产绒毛组织滋养细胞miRNA．27a瘦素分类号：R714．21III万方数据AbstractStudiesontheexpressionandfunctionofRSA--relat