坛紫菜糖苷合成途径中关键基因的研究

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1、Q74公开分类号：____________密级：______________ＵＤＣ：____________单位代码：______________11646坛紫菜糖苷合成途径中关键基因的硕士学位论文研究论文题目：坛紫菜糖苷合成途径中关键基因的研究赖晓娟1111075010学号：_________________________姓名：_________________________赖晓娟专业名称：________________生物化学与分子生物学_________学院：_________________________海洋学院指导教师：____________

2、_____________陈海敏论文提交日期：2014年6月15日万方数据Q74公开分类号：____________密级：______________ＵＤＣ：____________单位代码：______________11646硕士学位论文论文题目：坛紫菜糖苷合成途径中关键基因的研究学号：_________________________1111075010姓名：_________________________赖晓娟生物化学与分子生物学专业名称：_________________________海洋学院学院：_________________________

3、陈海敏指导教师：_________________________论文提交日期：2014年6月15日万方数据AThesisSubmittedtoNingboUniversityfortheMaster’sDegreeResearchonthekeygenesinthebiosyntheticpathwayoffloridosideinPyropiahaitanensisCandidate：XiaojuanLaiSupervisors：(Associate)ProfessorHaiminChenFacultyofMarineSciencesNingboUniver

4、sityNingbo315211，ZhejiangP.R.CHINADateJune15,2014万方数据独创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得宁波大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。签名：___________日期：____________关于论文使用授权的声明本人完全了解宁波大学有

5、关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。（保密的论文在解密后应遵循此规定）签名：___________导师签名：___________日期：____________万方数据宁波大学硕士学位论文坛紫菜糖苷合成途径中关键基因的研究摘要甘油-3-磷酸（glycerol-3-phosphate，G3P）被认为是植物防御信号转导途径中的一个新的调控因子，在红藻坛紫菜中，G3P是合成红藻糖苷（floridoside）的一个重要前体物质。作为坛紫菜中主要的光

6、合产物及渗透压调节物，红藻糖苷在其对外界环境的适应中具有重要作用。本文研究了坛紫菜中G3P和红藻糖苷在激发子flg22诱导及热胁迫条件下的含量变化，结果显示，G3P水平在两种处理条件下均显著升高，flg22诱导3h后，G3P含量可达对照的6.92倍；红藻糖苷含量在flg22诱导下出现下降，诱导2h后减少近24%；在热激30min后，红藻糖苷也有减少，但在恢复培养后含量增加，在3h后达到对照的1.92倍。结果提示，G3P和红藻糖苷均参与坛紫菜的防御反应及热胁迫响应。采用转录组测序联合RACE技术，克隆得到G3P合成的两个关键基因—甘油激酶和依赖NAD的甘油-3-磷

7、酸脱氢酶的cDNA全长序列，分别命名为PhNHO1和PhGPDH。PhNHO1完整ORF全长1728bp，编码576个氨基酸，拥有一个保守的ATP结合基序；PhGPDH完整ORF全长1158bp，编码386个氨基酸，在N端有一个保守的NAD结合结构域。它们与其它物种来源尤其是红藻的同源基因具有较高相似性，保守性高；进化分析显示，红藻的这两个基因均与动物的亲缘关系较近。在flg22诱导及热胁迫条件下，这两个基因均上调表达，其中PhGPDH的变化更为快速和剧烈，提示其为胁迫应答中G3P积累的主要贡献者。此外，在坛紫菜中克隆得到海藻糖-6-磷酸合成酶（TPS）基因家族

8、中3个成员的cDNA全长