中国荷斯坦奶牛lox-1基因多态性及其表达与泌乳性状的关联分析

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时间:2019-02-26

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1、万方数据分类号S墨13:3UDC硕士学位论文中国荷斯坦奶牛LOX-I基因多态性及其表达与泌乳性状的关联分析唐一波学科专业动塑遣佳直社当繁殖指导教师江明生.塾援论文答辩日期2Q!垒生§目25目学位授予日期2Q!垒生鱼目目答辩委员会主席郭亚莶麴援万方数据广西大学学位论文原创性和使用授权声明\删本人声明所呈交的论文,是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外,论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果,也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做

2、的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品,知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权,即:学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于:口保密,在年解密后适用授权。町不保密。(请在以上相应方框内打“√”)论文作者签名:麂,出指导教师签名:0州心澎作者联系电话:【够17“6仫y日期:山,驴、l『,’日期山,彭.6·妒电子邮箱

3、:☆7∞≥晒留2乞.‰万方数据中国荷斯坦奶牛LOX-1基因多态性及其表达与泌乳性能的关联分析摘要本试验探讨了采样方法对乳成分值的影响以及季节、胎次和泌乳期等因素对中国荷斯坦奶牛泌乳性能的影响,并测定分析奶牛空腹血糖、甘油三脂、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白等生化指标值与乳成分值相关性;应用DNA池筛选LOX-1基因单核苷酸突变(.SNP)位点,通过高分辨率溶解曲线结合测序分析SNP与泌乳性能的相关性;探讨了基因启动子区域是否存在甲基化调控基因的表达;获得奶牛乳汁体细胞总RNA,克隆基因全长编码区序列,并利用LOX.1和p-actin检测以及

4、比较其在不同个体间的表达情况,为奶牛的遗传育种提供参考依据。取得主要研究结果如下:1、采样方法极显著影响乳成分值(P<0.01);季节、泌乳期和胎次均极显著影响奶牛的泌乳量、乳脂率、乳蛋白率和乳糖值(P<0.01)。奶牛305d泌乳量与乳脂率、乳蛋白率呈极显著负相关;乳脂量与乳蛋白量与305d泌乳量呈显著正相关;奶牛血清的低密度脂蛋白与乳脂率间的相关系数极显著,表明血液中低密度脂蛋白含量与奶牛乳脂含量值密切相关。2、经检测内含子4上双碱基突变10839/10840(TG/CA)表现低度多态(PIC分别为0.200,0.238)其余多态位点表现为中

5、度多态(PIC>0.25),且未达到Hardy—Weinberg平衡(P<0.05)。外显子34927万方数据T_G、5132C_T使编码氨基酸由苯丙氨酸、苏氨酸变为缬氨酸和异亮氨酸。5’非编码区、外显子3等8个突变位点多态性显著影响奶牛泌乳性能。5’非编码区没有检测出甲基化,其对泌乳性能影响是否与甲基化调控有关还有待进一步研究。3、建立乳汁体细胞提取RNA和检测基因表达的方法。试验结果表明牛奶中的体细胞含量丰富,活力能够达到提取RNA要求;从体细胞提取的RNA完整性、纯度可以用来合成cDNA,LOX.1基因编码区全长序列810bp扩增正确。不同

6、泌乳量、乳脂率个体奶牛LOX.1的表达量有显著差异,可初步推测LOX-1基因参与奶牛脂肪代谢调控。关键词:奶牛泌乳性能氧化型低密度脂蛋白受体l(LOX.1)单核苷酸多态性(SNP)万方数据STUDYoNRELATlONSⅢPBETWEENPoLYMORPⅢSMANDEXPRESSION0FLOX.1GENEANDⅣⅡLKPRODUCTIONTRAITSINCⅢNAHoLSTEINABSTRACTInthisstudy,weexploredtheinfluenceofsamplingfactorsondeterminationofmilkcompo

7、sitionfactorsandtheinfluenceofseasons,parityandlactationperiodonChinaHolsteinCOWSmilkproductiontraits,andmeaSured也ebiochemicalindicators,suchasHolsteinCOWSfastingblood-glucoseandtriglyceride(TG),totalcholesterol(TC),highdensitylipoprotein(HDL)andlowdensitylipoprotein(LDL)anda

8、nalyzedthecorrelationbetweenthemandmilkcomposition.Meanwhile,weexplo

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