高湿环境对大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶及α-酮戊二酸脱氢酶的影响

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1、高湿环境对大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶及α-酮戊二酸脱氢酶的影响李昆郭鑫杨芸李薇王超宋富强呼永河*中国人民解放军成都军区总医院中心实验室，成都市，610083[提要]目的观察高湿环境对肝脏异柠檬酸脱氢酶（IDH)与α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDHC）含量的影响。方法SD大鼠随机分为常温常湿对照组、高湿环境20、30、40天组，采用人工气候箱模拟高湿环境，条件设置为温度25℃、相对湿度90-95%RH，实验组大鼠每天置于箱中10小时，其余时间与常温常湿对照组饲养于清洁环境（温度22-26℃，相对湿度40-60%RH）。酶联免疫法（ELISA）检测指标

2、。结果高湿环境20天，肝脏IDH、α-KGDHC及血清乳酸含量较常温常湿对照组无显著变化。高湿环境30、40天，肝脏IDH含量分别降至常温常湿对照组的75.98%和79.90%（P＜0.05），α-KGDHC含量分别降至常温常湿对照组的80.00%和81.01%（P＜0.05）；血清乳酸含量较常温常湿对照组分别升高了34.58%和23.33%（P＜0.01）。病理切片显示高湿环境40天大鼠肝脏点状坏死灶增多。结论高湿环境可致肝组织三羧酸循环关键酶含量及氧化磷酸化效率降低，糖酵解活跃，血乳酸升高，机体内环境发生相应改变，导致不适及损害。[基金项

3、目]全军医学科技“十二五”重点项目（BWS11J067）[通信作者]*呼永河，Tel：028-86570206E-mail:huyonghe@vip.126.com[关键词]高湿异柠檬酸脱氢酶α-酮戊二酸脱氢酶乳酸自然环境与人类生存和活动密切相关，特殊的环境气候条件会对机体产生多方面的影响，诱发机体不适和相应的病理生理改变。高湿作为一种极端气候环境，当湿度大于60%以上，机体各器官功能将产生各种反应和病理改变[1，2,3]。为探讨高湿环境下机体能量代谢功能的变化，本研究利用人工气候箱模拟高湿环境，观察大鼠肝脏异柠檬酸脱氢酶（isocitrat

4、edehydrogenase，IDH)与α-酮戊二酸脱氢酶（α-ketoglutaratedehydrogenase，α-KGDHC）的改变，现将实验结果报告如下。1.材料与方法1.1实验动物与分组采用3-4月龄清洁级健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（成都达硕生物科技有限公司提供，实验动物许可证号：scxk(川)2008-24），体质量180±10克，随机分为4组，每组8只动物。1.2动物模型制作选用多段编程人工气候箱（型号：RXZ-1000A-zl，中国宁波江南仪器厂）模拟高湿环境，设置高湿环境模拟条件：温度为25℃、相对湿

5、度90-95%RH，大鼠置于箱内每天10小时后，取出置清洁环境中饲养，分别持续20、30、40天。常温常湿对照组饲养于清洁环境，环境条件：22-26℃，相对湿度40-60%RH。动物模型制作完成后，乙醚麻醉，采取腹主动脉血、肝组织标本分别检测。1.3仪器及试剂ThermoMultiskanGO全波长酶标仪，岛津UV2450紫外-可见分光光度仪。采用武汉伊莱瑞特生物科技有限公司生产的酶联免疫检测试剂盒，南京建成科技有限公司生产的血乳酸测定试剂盒测定相关指标。1.4统计分析实验结果以平均值±标准差（X±SD）表示,采用SPSS13.0统计分析软件

6、，各模型组与常温常湿对照组比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异显著。2.结果2.1常规病理切片观察：与常温常湿对照组比较，除高湿40天组肝脏局部点状坏死灶增多外，其余各组肝脏汇管区、肝细胞板结构、肝窦及其细胞成分、中央静脉等均无显著形态学改变(见下图)。常温常湿对照组（×40）高湿环境20天组（×40）高湿环境30天组（×40）高湿环境40天组（×40）2.2肝脏IDH、α-KGDHC含量及血清乳酸变化：高湿环境20天，肝脏IDH、α-KGDHC及血清乳酸含量较常温常湿对照组无显著变化。高湿环境30、40天，肝脏IDH含量分别降至常温

7、常湿对照组的75.98%和79.90%（P＜0.05）；肝脏α-KGDHC含量分别降至常温常湿对照组的80.00%和81.01%（P＜0.05）；血清乳酸含量较常温常湿对照组分别升高了34.58%和23.33%（P＜0.01）（见表1）。表1肝脏组织IDH、α-KGDHC含量及血清乳酸变化（n=8）组别异柠檬酸脱氢酶IDH（ng/mg蛋白）α-酮戊二酸脱氢酶α-KGDHC（ng/g蛋白）血清乳酸LD（mmol/L）常温常湿对照组1.353±0.237592.81±95.484.419±0.329高湿环境20天组1.376±0.204565.2

8、6±68.924.875±0.479高湿环境30天组1.028±0.249▲474.22±67.84▲5.947±0.617▲▲高湿环境40天组1.081±0.32