几种补肾调肝中药促排卵机制及临床研究论文

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1、南方医科大学2008级硕士学位论文几种补肾调肝中药促排卵机制及临床研究APreliminarystudyofOvulationinductionmechanismandapplicationofBushenTiaoganChineseherbalmedicine课题来源:专业名称妇产科学学位申请人马从顺指导教师邢福祺教授答辩委员会主席罗深秋教授答辩委员会成员王浩教授张金玉教授李红副教授刘国炳教授论文评阅人王浩教授刘国炳教授2011年6月9日广州硕士学位论文几种补肾调肝中药促排卵机制及临床研究硕士研究生:

2、马从顺指导教师:邢福祺教授摘要研究背景多囊卵巢综合征(ploycysticovariansyndromePCOS)是导致排卵障碍的最常见的原因,该病以无排卵、卵巢多囊性改变和高雄激素血症或高雄激素表现为主要特征,临床表现多样。包括月经异常(月经稀发、闭经、功能失调性子宫出血)、不孕、多毛、痤疮、肥胖、多棘皮症等,并常伴胰岛素抵抗、高胰岛素血症及高脂血症;其中9.30%的患者还伴有血清催乳素水平增高。该病还与早期妊娠丢失、妊娠晚期合并症及卵巢癌等泌尿生殖系恶性肿瘤的发病等有一定的关联。目前对于该病的发病机

3、制及诊断尚存在不少争议。目前西医治疗PCOS的主要的手段有:饮食控制、药物治疗及手术治疗。但有部分患者在规范的西医治疗后仍未能获得满意的临床结局。中医中药从“肾、肝”等论治取得不错的临床疗效。只是目前关于中药促排卵大多数依旧是经验用药,缺乏实验依据,临床应用时可重复性差等不足;邢福祺教授先前的基础实验提示一些药物如仙茅、巴戟天、肉苁蓉、菟丝子、淫羊藿、熟地黄、枸杞子等七味补肾中药显著性增加大鼠垂体细胞分泌FSH的量,芍药、甘草、仙茅、巴戟天等四味中药能显著降低大鼠垂体前叶细胞催乳素的分泌量。本研究依据先

4、前的实验依据,并依据中医从“肾、肝"论治排卵障碍的理论,选取仙茅、巴戟天、菟丝子、淫羊藿、白芍药及甘草等六味药合用,探讨上述六味药物对排卵障碍小鼠的促排卵作用和机制。并观察上述药物在多囊卵巢综合征患者中的临床疗效。摘要第一章几种补肾调肝中药促卵泡发育机制的实验研究目的利用排卵障碍模型小鼠,观察仙茅、巴戟天、菟丝子、淫羊藿、白芍药及甘草等六味补肾调肝中药对子宫及卵泡发育的影响,并初步探讨上述中药可能的促卵泡发育机制。方法1.无排卵小鼠模型的建立与分组:选择5日龄雌性昆明小鼠120只,随机选择100只于颈背

5、部皮下注射丙酸睾丸酮O.04ml(1ml:25mg),其余20只小鼠相同部位皮下注射等量中性茶油O.04mL作为对照(F组)。将注射过丙酸睾丸酮的小鼠随机分为5组,A组为低剂量中药处理组,B组为中等剂量中药处理组,C组为高剂量中药处理组,D组为克罗米芬对照组,E组为模型组;A、B、C、D、E组小鼠自8周龄大小时开始每日取阴道脱落细胞涂片镜下观察,连续十日,涂片出现持续性角化细胞提示造模成功。2.给药方法:造模成功后开始每日灌胃,A组小鼠每日0.59/rnl中药0.5ml灌胃,连续10天,B组小鼠每日19

6、/ml中药O.5ml灌胃,连续10天,C组小鼠每日29/ml中药0.5ml灌胃,连续10天,D组小鼠每日1.2mg/ml枸橼酸克罗米芬0.5ml灌胃,连续10天,E、F组每日蒸馏水0.5ml灌胃连用10天。3.标本的获取:所有小鼠均与最后1次灌胃后24小时称重,后摘取眼球取动静脉血约1.0ml于促凝采血管中,离心后分离血清,并保存在4℃冰箱中待检测。采血后颈椎脱臼法处死小鼠,常规消毒后逐层剪开小鼠腹壁、腹膜,顺子宫向上找到小鼠卵巢组织,剪下小鼠子宫及卵巢,剔除周围筋膜及脂肪组织,标本称重,称重后经标记迅

7、速投入4%甲醛溶液中固定。同时计算每只小鼠的子宫指数(m∥lOOg)及卵巢指数(mg/lOOg)。4.激素的测定及免疫组化检测生长分化因子.9(growthdifferentiationfactor9GDF.9)的表达:放射免疫法测定小鼠血清雌二醇及卵泡刺激素浓度,常规Ⅱ硕士学位论文防脱石蜡切片,免疫组织化学法(SABC法)测定小鼠卵巢中生长分化因子-9的表达,每组均设一切PBS代替一抗作空白对照。并按以下标准对免疫组化结果进行判读:采用盲法阅片。阳性判断标准:每张染色片随机选取5个视野,以背景清晰,细

8、胞质着色呈棕黄色为阳性反应,据阳性颗粒的强度及阳性细胞的比例进行如下判断,并分为(一)、(+)、(++)、(+++)4个等级。5.统计学方法:数据均用统计软件包SPSS19.0分析,计量资料用x+sd表示,计数资料用率表示;计量资料先进行正态性检验和方差齐性检验,对呈正态性分布和方差齐同的数据,进行方差分析;对不呈正态性分布和方差不齐的数据使用基于方差不齐的近似方差分析。两两间的比较采用LSD法(方差齐性)或Dunnett.T3法(方差不齐

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